CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞在小儿急性白血病发病中的作用探讨
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【摘要】 目的：探讨分析CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞在小儿急性白血病(AL)发病中的作用。方法：回顾性分析我院儿科2008年6月-2010年10月确诊并收治的急性白血病患者，其中初诊患儿20例为A组，经治疗完全缓解患儿20例为B组以及20例身体健康的志愿者20例作为C组，使用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+T细胞数量和所占比例。结果：在CD4+T细胞的表达率上C组明显低于A、B组的值，差异具有统计学意义(P<0.05)。在CD4+CD25+ T细胞表达率上，A组显著高于B组和C组，差异具有统计学意义(P<0.05)，而B组与C组之间数值差异则无统计学意义。结论：CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的数量会在小儿急性白血病发病时增加治疗后下降，可以根据次特点指导临床上制定治疗方案。
【关键词】 CD4+CD25+Treg细胞；急性白血病
CD4+CD25+细胞又称之为调节性T细胞，在1995年由Sakaguchi等人首次分离得出，并被证明在免疫调节上的作用。近年来其在血液疾病中发生、发展中有有重要意义，我院现研究其在小儿急性白血病发病时外周血中的表达情况，报道如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料 回顾性分析我院儿科2008年6月-2010年10月确诊并收治的急性白血病患者，其中初诊患儿20例为A组，经治疗完全缓解患儿20例为B组以及20例身体健康的志愿者20例作为对照组即C组。三组患儿中男39例，女21例，年龄3-15岁，平均6.1±1,9岁，三组患儿在年龄、性别等方面差异无统计学意义，具有可比性。
1.2 检测方法 三组人员均在清晨空腹采血，使用标准采血管，检验科要在6h内进行外周血预处理，应用直接免疫荧光标记溶血法。然后在从处理后的血液中取100μL放置于流式检测管，向其中加入CD45单克隆抗体。同法再继续取5管分别加入CD4、CD25、FITC、PerCP，最后做一管阴性对照加入γ1/γ2α，每种单克隆抗体加入量为20μL。按照标准做好各个管好将其放入4℃避光孵育30min。每管再加入1000μL溶血素将红细胞裂解，混匀后再在室温下孵育10min，进行1500r/min离心处理5min，结束后弃上清液加入配置好的缓冲液，使用流式细胞仪检测。试验中所用的试剂鼠抗人单克隆抗体以及γ1/γ2α、流式细胞仪均来自美国Becton Dickinson公司，溶血素来自美国MRC公司。进行调节性T(Treg)细胞检测先要确定淋巴细胞群，然后再划定CD4+T细胞区域，此时找出CD25表达较强处细胞为目标细胞CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞，此时记录目标细胞的百分率，注意排除非特异性对照值。
1.3 统计学处理 对本组资料采用SPSS13.0进行统计学分析，并对两两比较的资料采用t检验，计数资料率的比较用卡方检验，检验水准设定为0.05，当P<0.05说明有差异。
2 结果
从表1中可以看出CD4+T细胞的表达率上B组高于A组，但是差异无统计学意义(P>0.05)。C组则明显低于A、B组的值，差异具有统计学意义(P<0.05)。在CD4+CD25+T细胞表达率上，A组显著高于B组和C组，差异具有统计学意义，而B组与C组之间数值差异则无统计学意义(P>0.05)。
表1三组患者CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞表达水平比较
3 讨论
CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞属于体液免疫淋巴细胞群，具有免疫调节能力，随着近年来研究上的进展，发现其在肿瘤发生发展的过程中也起着重要的作用。杨云等专家认为[1]，在成年人白血病发病期CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞数量会增多，在经过治疗后Treg细胞数量会有所下降，说明治疗有效果。
然而由于小儿的免疫调节能力与成人有差别，故在小儿急性白血病发作时外周血中Treg细胞的数量变化是否与成人相同则不清楚。并且在成年患者中初诊时外周血Treg细胞表达率低得患者经过药物以及化疗治疗后缓解程度更好[2]。所以本院研究在小儿急性白血病发病时CD4+CD25+ T细胞的含量与疾病的关联性。结果显示治疗后缓解组的CD4+CD25+ T细胞表达率要低于初诊组，说明治疗后其数量下降。并且出诊组在CD4+T细胞和CD4+CD25+T细胞数量上均高于健康对照组，此处结果与成人是一致的。其发生机制可能是Treg细胞其控制自身免疫的功能发挥作用 ......
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