护心灵对血管内皮细胞的保护作用
 |
| 第1页 |
参见附件(1110KB，1页)。
【摘要】 目的：探讨护心灵对HUVECs氧化损伤的保护作用。方法：本实验采用250umol/LH2O2造HUVEC氧化损伤模型，分组给药，用MTT法测定护心灵含药血清对氧化损伤HUVECs的保护作用，同时进行形态学观察。结果：250umol/L H2O2对HUVECs有损伤作用，对HUVECs氧化损伤有一定的保护作用。
【关键词】 护心灵；HUVECs
血管内皮细胞不仅是细胞与血液物质交换的第一屏障。血管内皮细胞受损后，血管内皮结构及功能发生改变。
1 实验材料
1.1 细胞 人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)，由南京中医药大学药理教研室提供
1.2 试验器材与器械 超净工作台：苏州净化设备厂，HF151型UV CO2培养箱：上海力申科学仪器有限公司，IX50倒置显微镜：日本OLYMPUS 光学工业株式会社，LZD5-2台式高速离心机：北京医用离心机厂， JA-1203电子天平：上海天平仪器厂，AY120型分析天平：Shimadzu corporation，Japan
1.3 主要试剂：护心灵：由南京中医药大学提供，RPMI-1640干粉培养基：GIBCO公司产，胰蛋白酶:SIGMA公司生产，噻唑蓝(MTT)：SIGMA公司生产，维生素E(VE)：美国Sigma公司
2 试验
2.1 对氧化损伤的HCUVECs的保护作用
2.1.1 MTT法检测原理 MTT检测法是一种检测细胞存活和生长简便准确的方法，可间接反映细胞增殖情况。其原理是活细胞生长和增殖过程中线粒体中的琥珀酸脱氢酶能将黄色可溶的MTT降解成紫蓝色的化合物，而死亡细胞则不能。显色深度随活细胞数增加的而增加，吸光值就随之相应升高[1]。
2.1.2 试验方法 将HCUVECs用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液配制成单个细胞悬液，以每孔104个细胞接种于96孔板中，置37℃，5% CO2培养箱中培养，细胞单层融合后，弃去上清，加入各组相应药物，培养12h后，加入含有终浓度为250μmol/L H2O2的不含小牛血清的RPMI-1640培养液，作用12h，通过MTT法使用酶联免疫检测仪进行相关指标的测定。
2.2 数据处理和分析 统计学方法：实验数据用均数±标准差(X±S)表示，采用SPSS13.0 for windows分析软件，两组间数据比较进行t检验，以P<0.05为有显著性差异。
3 结果
3.1 对细胞形态学的影响：倒置显微镜下观察各组细胞，正常细胞：细胞呈梭形、多角形或圆形,饱满，细胞间连接紧密，呈铺路石状生长，未见悬浮细胞。(见图1)H2O2处理之后：细胞呈不同程度及范围的收缩，肿胀变圆，出现不同程度的细胞脱壁悬浮，部分细胞自溶。(见图2)护心灵各组的细胞，细胞形态学的改变减轻显著。(见图4-6)
3.2 对H2O2损伤内皮细胞的影响：和空白组相比，正常组OD值无显著性差异(P>0.05)；和正常组相比，模型组OD值显著降低(P<0.01)；和模型组相比，VE组、护心灵Ⅱ组、护心灵Ⅲ组显著升高(P<0.05)。(结果见表1、图A)
表1护心灵对氧化损伤HUVECs的保护作用(X±S)
▲▲P<0.01 vs SHR control group；*P<0.05 , **P<0.01vs model group
图A护心灵对氧化损伤HUVECs的保护作用
血管内皮细胞位于心血管内腔面，是血管腔的机械屏障。它不仅是细胞与血液物质交换的第一屏障而且它还具有分泌功能。当血管内皮细胞受损后, 血管内皮结构及功能会发生改变可导致各种病症。寻找和开发保护内皮细胞、抑制内皮细胞凋亡或死亡的药物，为临床开辟新的治疗思路具有十分重要的意义。
血管内皮细胞位于循环血液与血管壁内皮下组织之间，它可分泌多种血管活性物质通过产生内皮依赖性因子来调节血管张力和血管生长[2] ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(1110KB，1页)。