严鹏科 赵 慧 黄 煌 梅峥嵘 段才闻

    1.广州医学院附属第三医院药剂科，广东广州 510150；2.南华大学病理研究所，湖南衡阳 421001；3.南华大学药物药理研究所，湖南衡阳 421001

    肿瘤的生长和转移，均呈明显的新生血管依赖性。因为新生血管是提供病理组织养分保证肿瘤生长增殖的基础，同时，肿瘤新生的血管使得肿瘤细胞与个体的血管循环系统直接相通，这也是恶性肿瘤发生远处转移播散的必要条件。在实体肿瘤中，微血管网络承担着输送营养物质和排泄代谢废物的作用，是肿瘤生长和复发不可缺少的前提条件之一。肿瘤要达到1～2 mm3以上[1]，必须生成新的血管以阻止肿瘤细胞的凋亡。因此，如何有效的截断肿瘤的血供、抑制新生血管，已经成为肿瘤治疗及防止肿瘤扩散的研究方向。血管生成方面的研究很多，目前已有药物应用于临床，通过阻断肿瘤血管生成抑制其生长、复发和转移，其疗效不令人满意，因为血管生成的关键调控因素尚不清楚。

    Jagged 1是哺乳动物中第一个被证实的Notch受体的配体，参与调控许多组织的生长发育，在肌肉形成、神经、血管发生和维持正常造血前体细胞及其增殖等过程中起着重要作用[2]，Jagged 1在肿瘤新生血管形成中也起了重要的作用，它在新生血管形成与肿瘤浸润、转移中的作用受到越来越多的关注。本研究建立鸡胚绒毛尿囊膜模型，动态观察血管发育不同时期Jagged 1的表达，探讨Jagged 1与血管发育的关系，并在正常的结直肠组织和不同大小结直肠癌组织中观察Jagged 1的表达，为肿瘤的治疗寻找新的靶点。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    人脐静脉内皮细胞株EA.HY926，由中南大学湘雅医学院细胞中心引进。种蛋购自衡阳联合养鸡公司，选用新鲜、大小适中的优质种蛋，半自动孵化箱自行孵育。在解放军169医院批准同意和告知患者家属同意后，收集解放军169医院外科手术切除的结直肠癌旁正常黏膜组织5例，结直肠癌新鲜标本15例，其中男11例，女4例；年龄28～75(平均56.9)岁；肿块直径≤3 cm患者、3 cm<肿块直径≤5 cm患者、肿块直径>5 cm患者各5例，手术切除的血管瘤旁正常皮肤组织和皮肤血管瘤新鲜标本各8例，其中男4例，女4例；年龄8～32(平均20.1)岁，所有标本均由病理组织学诊断证实。

    1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养 内皮细胞用含10%新生牛血清的DMEM培养液培养于37℃、5% CO2的恒湿培养箱中。细胞呈单层生长，铺满培养瓶后传代 ......