林小满 谢 娜 徐 杨

    徐州医学院附属医院妇产科，江苏徐州 221002

    Bmi-1(B-cell-specific moloney murin leukemia virus insertion site 1)基因早期发现在造血及神经系统的发育过程中起重要作用，它维持干细胞的自我更新能力。近年来发现Bmi-1与肿瘤的发生关系密切，在多种肿瘤中高表达。siRNA干扰技术是目前研究癌基因作用的常用方法，为研究Bmi-1基因在子宫内膜癌发生发展中的作用，本实验在Ishikawa子宫内膜癌细胞中，运用siRNA干扰技术，检测其干扰沉默Bmi-1基因的效果，为下一步研究奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与材料

    Ishikawa细胞株(上海复祥生物科技有限公司)，DMEM/F12、Opti-MEM(GIBCO公司)，胰蛋白酶(南京博尔迪生物科技有限公司)，RT-PCR试剂盒(Promega公司)，Lipofectamine2000(Invitrogen公司)，Matrigel基质胶(BD公司)，RT-PCR引物(上海生工生物技术有限公司合成)。Bmi-1引物序列上游为5’-TACAGAGTTCGACCTACTT-3’，下游为 5’-TGATGACCCATTTACTGA-3’，碱基对为291 bp，β-actin上游引物序列为：5’-CTGGGACGACATGGAGAAAA-3’，下游引物序列：5’-AAGGAAGGCTGGAAGAGTGC-3’，碱基对564 bp；siRNA由上海吉玛公司设计 ......