sTREM-1在内毒素诱导急性肺损伤早期的作用及意义*
抗炎,浆液,细胞因子,1材料与方法,1试剂,2动物模型,3血浆中IL-1β,IL-6,IL-10,sTREM-1的检测,4肺组织中IL-1β,5统计学分析,2结果,1血浆中sTREM-1和IL-10的变化
朱运奎 李超然2, 薛庆亮 李继东1.兰州军区兰州总医院呼吸内科,甘肃兰州 730050;2.兰州大学第二医院,甘肃兰州730030
髓细胞触发受体(TREM)是Bouchon等在2000年发现的免疫球蛋白超家族的受体蛋白[1]。它主要存在于中性粒细胞和高表达CD14的单核巨噬细胞。其中对TREM-1的研究最多,它能触发和扩大炎症反应。sTREM-1是其可溶性形式,为TREM-1缺乏跨膜结构域的分泌型蛋白。目前认为sTREM-1可能是膜结合蛋白TREM-1在基质金属蛋白酶作用下的裂解产物,发挥对TREM-1的负性调控作用[2-3]。近年来,对sTREM-1与肺内各种炎症性疾病的研究较多,而且显示其具有重要的鉴别、诊断和预测价值。本实验将通过对sTREM-1的检测,对其在LPS导致的ALI早期的作用和意义进行观察和探讨。
1 材料与方法
1.1 试剂
大肠杆菌内毒素(LPS)购自sigma公司;IL-1β、IL-6、IL-10和sTREM-1试剂盒购自R&D ;考马斯亮蓝法蛋白浓度测定试剂盒购自上海美季(MBchem)生物技术有限公司。
1.2 动物模型
健康昆明种小鼠40只,雄性,体重(23±2)g,随机分为对照组和LPS组,LPS组尾静脉注射5 mg/kg的LPS后分别于1、4、8 h在10%的水合氯醛(3 mL/kg)麻醉下活杀,提取肺组织标本和血液标本(抗凝管保存)。对照组尾静脉注射等量0.9%生理盐水后1 h相同条件下提取肺组织标本和血液标本。
1.3 血浆中IL-1β、IL-6、IL-10、sTREM-1的检测
血标本3 000 rpm离心15 min,取上清液,ELISA法检测各细胞因子,按说明书进行操作,复孔检测。
1.4 肺组织中IL-1β、IL-6、IL-10、sTREM-1的检测
冰浴下手动匀浆肺组织(1︰9混于生理盐水) ......
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