虫草多糖的分离纯化及含量测定(2)
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2.4.3?沉淀物的处理?用研钵研碎发酵所制得的菌丝体，加蒸馏水至体积的10倍，水浴加热96～100℃条件下浸提3 h，反复浸提3次并将滤液合并，加入95%乙醇至4倍体积并低温沉淀过夜，离心制得沉淀，然后用乙醇和丙酮各洗涤2次，干燥，得粗多糖。
2.5?发酵液多糖的测定[4]
2.5.1?制作葡萄糖标准曲线?将葡萄糖标准溶液(100 μg/mL) 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL加入试管中，加蒸馏水至10.0 mL。用移液管分别移取2.0 mL加入比色管中。滴入重蒸苯酚溶液1.0 mL，震动摇晃均匀，立即加入浓硫酸5.0 mL摇匀，静置10 min，水浴加热30 min，温度40℃。
在波长490 nm处，测定每个管的吸光度，得A值(以2.0 mL蒸馏水作为空白)。横坐标为蔗糖浓度，纵坐标为吸光度A做标准曲线，制得回归方程：y=0.004 3x+0.029 9。
2.5.2?测定样品含量?将干燥至恒重的发酵液精多糖50 mg，用减量法称取后放置在100 mL容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀，作标号Ⅰ。取样品液Ⅰ 1.0 mL ......
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