兔急性房颤时心房肌钙通道α1C、β1及钾通道Ikr的表达和药物干预(2)
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1.2.4 蛋白质的提取与Western blot 取100 mg组织放入研钵剪碎研磨(在冰上进行),加入蛋白提取液300μL、10%蛋白抑制剂30μL继续研磨,吸取提取液冰浴放置30 min,4℃ 12 000 rpm离心10 min,吸取上清,按Bradford比色法测定蛋白浓度,加loading buffer煮沸5~10 min。聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分离蛋白质,半干式电转膜90 min,5%脱脂牛奶的TBST封闭液,室温1 h,分别加α1C、Ikr单克隆抗体4℃封闭过夜,加入含有1∶2000稀释辣根酶标记的相应二抗工作液,室温下孵育1 h,X光片曝光显影,用Sicon Image软件对Western blot条带进行灰度分析,按:蛋白相对含量=该蛋白条带的灰度值/上样对照条带的灰度值公式计算蛋白相对含量。
1.3 统计学处理
用SPSS17.0统计软件进行分析,所有计量资料以()表示,检验2个或2个以上样本率用x2检验,多组间均数比较用方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 刺激组、伊布利特组、参松养心胶囊组、联合用药组房颤诱发情况
联合用药组、伊布利特组两组房颤诱发率明显低于刺激组(分别为x2=5.48,P=0.01;x2=4.84,P=0.02),伊布利特组与联合用药组比较无统计学差异(x2=2.12,P=0.34)。参松养心胶囊组与刺激组比较,差异无统计学意义(x2=0.68,2.2 α1C、β1、IKr基因表达水平
联合用药组、伊布利特组、参松养心胶囊组、刺激组L型钙离子通道α1C、β1基因表达水平均低于正常组(t=6.47,P<0.01)。伊布利特组α1C、β1基因表达水平高于刺激组(t=5.86,P<0.01),伊布利特组α1C、β1基因表达水平高于参松养心胶囊组(t=8.26,P<0.01);伊布利特组与联合用药组比较α1C、β1基因表达水平无明显差异(t=1 ......
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