HPLC法测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量(2)
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参见附件。
2.2 对照品与供试品溶液的制备
对照品制备：将5 mg钩藤碱和异钩藤碱对照品用甲醇溶液溶解，并用容量瓶定容至5 mL，得到钩藤碱和异钩藤碱的原液。再分别取20、40、80μL的原液用加甲醇分别定容到2 mL，得到溶度分别为20、40、80 μg/mL的钩藤碱异钩藤碱对照品。供试品制备：取钩藤粉末2 g，放入200 mL的甲醇中浸泡24 h之后再超声30 min，过滤得到供试液。
2.3 线性关系考察
精密量取20μL浓度分别为20、40、80μg/mL钩藤碱、异钩藤碱对照品进样，并以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制其含量的HPLC标准曲线，得到钩藤碱和异钩藤碱的线性方程分别为Y=0.999 E + 6x-21 133，R2=0.9998和Y = 1.008 E+ 6x-13 556，R2=0.9999。结果显示钩藤碱和异钩藤碱分别在0.244～1. 534 μg和0.226～1.288μg浓度范围内其浓度与峰面积具有良好的线性关系。
2.4 实验方法精密度、稳定性、重复性测试
精密称取供试品溶液5次，按测定对照品线性方程的方法测定其峰面积，结果显示中药钩藤提取液的峰面积RSD为1.15%，这表明本次实验所用的高效液相其精密度良好。之后再取钩藤提取液样品每次间隔2 h按上述方法进样 ......
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