牛黄清感胶囊对甲型H3N2流感病毒抑制和预防作用的实验研究(2)
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2.2.1.3 病毒攻击 将100TCID50甲型A/Brisban/10/2008(H3N2)流感病毒(采用病毒生长液(D-MEM培养基中含牛血清白蛋白组分12.5mL、青酶素100U/mL、链酶素100μg/mL，HEPES 12.5mL，TPCK-胰酶0.5mL)稀释后，接种经药物作用的MDCK细胞96孔培养板，每孔100μL，同时设病毒对照(100TCID50病毒液)，设正常细胞对照。36℃、5% CO2孵箱中吸附2h，弃掉病毒稀释液，采用Hank's溶液洗2次。
2.2.1.4 细胞培养及观察 每孔加入100μL病毒生长液，36℃、5% CO2孵箱培养，每24小时在倒置显微镜下观察细胞形态CPE变化，按2.1.1.3的指标判断药效。实验重复3次。
2.2.2 病毒MTT染色法
按2.1.2的方法。
3 实验结果
在MDCK细胞培养内，采用病毒细胞形态变化CPE法、MTT染色法，检测不同浓度的牛黄清感胶囊对甲型A/Brisban/10/2008(H3N2)流感病毒的预防作用。实验分1次用药组和3次用药组，用Probit回归法计算计算药物的半数有效浓度IC50，最小有效浓度MIC及治疗指数TI。3次实验结果见表2。
4 讨论
流行性感冒一直是世界高发的传染病之一，每年全球约有6亿人患流感，占总人口的10%。我国是世界上公认的流感多发地甚至是发源地，其机制尚不清楚。其中曾经引起世界性大流行的A(H3N2)亚型流感病毒自1968年以来一直在人群中存在[2]。流感病毒的抗原变异与流感的发生和流行密切相关，流感病毒正是通过不断改变其抗原性来逃避宿主特异性免疫的识别和清除 ......
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