乌骨藤多糖脱蛋白工艺的研究(2)
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4 讨论
乌骨藤多糖脱蛋白的目的在于为乌骨藤多糖的分离纯化及相关后续研究提供实验依据，故脱蛋白过程要兼顾考虑在多糖损失较少的条件下尽可能多的脱除蛋白质。目前脱蛋白可采用酶法、Sevage法、三氯乙酸法和联合脱蛋白[8]。酶法脱蛋白条件最温和，因为酶的专属性和特异性较强，只针对蛋白质进行酶促水解，低温水浴使多糖的损失较少，但需要调低参与酶法脱蛋白的溶液浓度，使酶解反应完全，反应成本较高；Sevage法脱蛋白反应较温和，利用蛋白质遇有机试剂变性的原理，操作多次才能脱除大部分蛋白质，脱蛋白次数越多多糖损失也越大；三氯乙酸法可在较少次数中脱除较多蛋白质，操作步骤简化，但其反应过于剧烈会导致多糖结构发生变化影响结构研究。
本实验采用酶法和Sevage法联合脱蛋白，本人曾对酶法脱蛋白工艺进行研究，通过四因素三水平正交试验对加酶量(1.5%、2.0%、2.5%)、pH值(5、6、7)、酶解温度(40℃、50℃、60℃)及时间(1h、2h、3h)因素进行考察，采用综合加权评分法分析结果显示加酶量与酶解时间对酶法脱蛋白有显著性影响，确定酶法脱蛋白工艺为酶用量2%，pH 7，40℃酶解1h ......
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