HPLC法测定当归藤中儿茶素的含量(2)
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参见附件。
3.2 方法选择
管海波等[7]在对当归藤化学成分的研究过程中,分离得到大量的儿茶素,并利用紫外分光光度法测定了当归藤中儿茶素含量,但紫外分光光度法精密度低,所以本文用HPLC法测定儿茶素的含量。
3.3 色谱条件的选择
照紫外-可见分光光度法,在200~800nm扫描,结果在280nm处有最大吸收,故选280nm为测定波长。分别比较甲醇-水(15∶85)、乙腈-水(15∶85)、甲醇-0.5%冰乙酸(15∶85、10∶90、20∶80)几个系统,以甲醇-0.5%冰乙酸(15∶85)效果最好。分别设定20℃、25℃、30℃、35℃不同的柱温进行比较,在30℃条件下,峰分离效果最好[8]。分别考察了0.8、0.9、1.0mL/min不同流速下的色谱图,分离效果都很好,但以0.8mL/min测得的柱效最高,因此确定最佳流速为0.8mL/min。
3.4 提取方法选择
分别采用索氏静置、回流提取和超声提取进行比较,超声与回流提取效果差不多,考虑到用超声比较简单,故选超声;另分别考察了相同取样量以5%、30%、50%、70%、95%乙醇进行提取 ......
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