Cx43与Smad1在胃癌组织中的表达及相关性研究(2)
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1.3 免疫组化染色检测Cx43与Smad1蛋白的表达及结果判定
鼠抗人Cx43抗体购自福州迈新生物技术开发有限公司,兔抗人Smad1抗体购自武汉博士德生物工程有限公司,采用SP免疫组化法,实验步骤按说明书进行,DAB显色,苏木素复染细胞核。以PBS代替一抗作为阴性对照,用已知正常胃黏膜组织的标准阳性切片作为阳性对照。Cx43阳性信号在正常胃组织主要表达于细胞膜,在胃癌组织中可表达于细胞浆。Smad1阳性信号在正常胃组织及胃癌组织中主要表达于细胞膜。在染色均匀的区域,选取5个高倍镜视野(×400):(1)按阳性细胞百分率(A值)评分:1%~25%为1分,25%~50%为2分,>50%为3分;(2)按染色强度(B值)评分:不着色为0分,浅棕黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分。综合染色阳性细胞数(A值)与染色强度(B值)判断结果,阴性(-):0分,弱阳性(+):1~2分,中度阳性(++):3~4分,强阳性(+++):5~6分。
1.4 统计学方法
采用SPSS17.0统计软件对数据进行统计学处理。各组间差异比较应用x2检验,P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 Cx43在正常胃组织及胃癌组织中的表达
Cx43在正常胃组织、高中分化胃癌和低未分化胃癌中的阳性表达率分别为76.67%,53.57%和15.63%,呈现下降趋势(x2=38.134,P<0.05)。见表1。并且细胞浆的染色强度也呈下降趋势。见图1~3。
在胃癌中,Cx43的表达在不同年龄、性别胃癌组织中无显著性差异(P>0 ......
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