丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长抑制的影响(2)
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1.2.3 细胞周期及凋亡的测定 取对数生长期MCF-7亲本细胞常规消化,接种于6个培养瓶,每瓶接种5×105个细胞,在37℃,5%CO2的条件下培养24h后,将其中的3瓶细胞采用浓度为5.0mmol/L的丁酸钠进行处理,同时设对照组,即为剩余的3瓶细胞,在相同条件下培养24h后收集不同处理组的细胞。在4℃的条件下细胞采用浓度为70%的乙醇固定过夜。用预冷的PBS在染色前洗3次。将200μL浓度为1mg/mL的 RNase A加入,在37℃条件下温育30min。将800μL浓度为100ng/mL的碘化丙锭(PI)染色液混匀后加入,在避光4℃条件下放置30min。DNA的含量采用流式细胞仪(CouIter-profilo II型)测定,细胞周期分布及细胞凋亡情况采用Multicycle DNA含量及细胞周期分析软件分析。
1.3 观察指标
(1)MCF-7细胞生长速度,倍增时间;(2)克隆形成率;(3)细胞周期:G1、S期、G2/M期;(4)凋亡细胞百分比。
1.4 统计学处理
将研究所得数据输入计算机,建立数据库,采用SPSS16.0统计学软件处理,符合正态分布的计量资料采用()表示,采用F检验对多组间差异进行比较,采用t检验对两组间差异进行比较,采用x2检验对计数资料组间差异进行比较,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 对MCF-7细胞生长速度及倍增时间的影响
2.1.1 对MCF-7细胞生长速度的影响 浓度为2.5、5.0、10.0mmol/L的丁酸钠处理的MCF-7细胞生长速度明显慢于亲本细胞,随着浓度的增加呈减慢趋势,差异有统计学意义(F=17.15,P<0.05)。见图1。
图1 丁酸钠对MCF-7细胞生长的抑制作用
2.1.2 各种浓度丁酸钠对MCF-7倍增时间的影响 MCF-7亲本细胞的倍增时间为(30 ......
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