1.2 冰冻亚型红细胞制备过程的质量控制方法

    1.2.1 起始血液的选择 (1)采集时间<6d。(2)无溶血和脂血。(3)HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP等传染性指标检测均为阴性。

    1.2.2 红细胞甘油化 (1)浓缩红细胞的制备：将起始血液按RCF1600g，离心10min，或1280g，离心18min，分离出浓缩红细胞，使红细胞压积控制在 (0.75±0.05)[4]。(2)添加甘油：①称取需要甘油化红细胞的重量，按终浓度40% [5]计算甘油添加量。②甘油的添加速度控制在8～10mL/min。③甘油化震荡频率控制在90～100次/min。④添加完毕室温静止平衡30min。(3)冰冻保存：①将室温平衡过的甘油化红细胞以RCF1250g，离心10min，去除多余的水分和甘油，使甘油化红细胞的压积保持在(0.60±0.05)[5]。②分装、标记后，置-80℃超低温冰箱中储存，冷冻过程中避免翻动尚未冻结的红细胞。

    1.2.3 红细胞融化及去甘油化 (1)红细胞融化：将冰冻红细胞从低温冰箱中取出，迅速投入37℃水浴箱中，不断轻轻摇动，使红细胞在5min内迅速融化，继续复温至红细胞表面温度达(20±2)℃[6]。(2)红细胞洗涤去除甘油：①用9%NaCl溶液洗涤1次，加入量为红细胞标计量的1/2，加入速度40～50mL/min，震荡频率90～100次/min， 静止平衡5min， 以RCF1250g，离心10min，去上清。②用1.6%NaCl溶液洗涤1次，加入量和红细胞标计量相同 ......