RNAi体外沉默淋巴管内皮祖细胞VEGFR—3基因表达(1)
RNAi体外沉默淋巴管内皮祖细胞VEGFR—3基因表达,VEGFR-3,聚乙烯亚胺,siRNA,淋巴管新生
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[摘要] 目的 应用聚乙烯亚胺(polyethyleneimine，PEI)包裹淋巴管内皮祖细胞(lymphatic endothelial progenitor cells，LEPCs)血管内皮生长因子受体3(vascular endothelial growth factor receptor-3，VEGFR-3)基因siRNA，体外沉默VEGFR-3基因表达，研究抑制LEPCs分化抗肿瘤淋巴管新生的作用。 方法 Ficoll法分离人脐血单个核细胞，流式细胞仪、免疫荧光分选并鉴定LEPCs。PEI包裹VEGFR-3siRNA并转染入LEPCs，流式细胞仪检测转染效率。RT-PCR和Western blot检测mRNA和蛋白质水平VEGFR-3基因沉默效果。 结果 VEGFR-3siRNA成功转入LEPCs，转染效率30%。VEGFR-3siRNA转染组LEPCs VEGFR-3mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。 结论 体外经由PEI介导的siRNA能有效的抑制LEPCs VEGFR-3的表达，为以LEPCs为靶点抑制肿瘤淋巴管新生提供了实验依据。
[关键词] 淋巴管内皮祖细胞；VEGFR-3；聚乙烯亚胺；siRNA；淋巴管新生
[中图分类号] R737.14 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616(2014)18-11-04
肿瘤淋巴管的新生与肿瘤转移有密切的联系，能否有效抑制肿瘤淋巴管新生成为肿瘤治疗的研究热点。2005年，Wang等[1]继Salven[2]之后提出了CD34+/CD133+/VEGFR-3+细胞为LEPCs ......
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