GS环保固定与传统固定染色在冷冻切片中应用(1)
 |
 |
[摘要]目的 探讨GS环保固定在冷冻切片中应用价值。 方法 选取标本300例，150例进行GS固定，150例使用传统固定液，比较两组在使用上出现刺激性气味、固定效果不佳及染色效果不佳的比例，并对骨组织脱钙和肺癌TIF-1+固定效果进行比较。 结果 GS固定染色套液临床使用上出现刺激性气味、固定效果不佳及染色效果不佳的比例显著低于常规组(P<0.05)。 结论 GS环保套液效果满意，具有在病理技术工作中推广应用的价值。
[关键词]GS环保固定；传统固定；冷冻切片
[中图分类号]R446.8 [文献标识码]B [文章编号]2095-0616(2014)20-139-03
GS environmental fixed and traditional fixed for stained in frozen sections
LIN Hong
Department of Pathology，the First People’s Hospital of Shenyang City，Shenyang 110041，China
[Abstract]Objective To study the effect of GS environmental fixed and traditional fixed for stained in frozen sections. Methods 300 cases specimen were choosed，150 parts were used GS environmental fixed，150 cases were used conventional fixed，then pungent odor appeared and poor staining of fixed effects and the effect of the proportion of lung cancer and bone decalcification and TIF-1+ fixed effects in the two groups were comparedd. Results Appear pungent odor liquid fixed and stained for clinical use on GS sets，poor results and poor staining of fixed effects were significantly lower than conventional group(P<0.05). Conclusion GS environmental fixed is satisfactory，it can huge promotion and application of technical work in the pathological value.
[Key words]GS environmental fixed；Conventional fixed；Frozen sections
医生可利用冷冻切片进行准确诊断，而固定与染色是决定冷冻切片是否能达到高水准的关键，所以应重视固定液与染液的选择和应用。目前常见的固定液类目广泛，但都达不到环保标准，且部分固定液，固定耗时长，显示效果差，对比度差，且易造成细胞肿胀、变形、空泡，易导致漏诊、误诊，延误治疗[1]。同时95%乙醇长时间固定无法保证组织细胞的形态，将固定时间缩短后，使用GS染色套液染色能够避免以上缺点，制片效果良好。传统固定液HE套液虽具有较好的临床效果，但其包含的二甲苯会导致人体神经系统、造血系统受损，且汞成分的使用也达不到环保排放的要求[2]。故本研究主要采用GS固定染色套液对病理切片进行冰冻切片处理，并与传统固定染色套液进行比较，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取2013年6～12月我院手术标本300例，其中有甲状腺、肝、肾、子宫、输卵管、脑、卵巢以及肠道等，随机选择其中150例进行GS固定染色套液固定(哈尔滨格林标本技术开发有限公司研制并生产)，另150例则使用传统固定液(主要成分为二甲苯)进行固定。
1.2 GS固定染色套液制片法及使用制剂
通过无醛型固定液对组织标本进行浸泡，并分别于固定后1、3、6、12、24h提取组织标本进行处理，使用的设备为SHANDON全自动病理组织固定切片机，依次使用组织固定剂、医用酒精、无水酒精、组织脱水剂、组织透明剂、浸蜡处理以及石蜡包埋等过程。对病理标本进行切片、HE染色、免疫组化染色和荧光原位杂交检测等。
1.3 研究方法及观察指标
所有标本进行编号，并按照数字随机法分为两组，比较两组使用上出现刺激性气味、固定效果不佳及染色效果不佳的比例，并对骨组织脱钙和肺癌TIF-1+固定效果进行比较。
1.4 统计学处理
应用SPSS13.0进行，计量资料以(x±s)表示，两组间均数的比较使用t检验，组间率的比较采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
GS固定染色套液临床使用上出现刺激性气味、固定效果不佳及染色效果不佳的比例显著低于常规组(P<0.05)。见表1，图1～4。
3 讨论
对手术标本进行组织处理时，组织固定会直接影响染色的效果。传统的固定组织以甲醛为主。它能有效穿透组织，较好的保持了组织原有形态，且使用成本低，所以至今仍被广泛应用。甲醛的主要缺点：(1)挥发性强，刺激性和腐蚀性很强，环境危害严重，且难以防护。研究表明[3]，甲醛接触皮肤会引发皮肤过敏等症状。长期使用甲醛还会诱发慢性呼吸道疾病、癌症发生，白细胞数量减少，记忆力和智力下降。(2)长时间存放的甲醛会部分转化为三聚甲醛，导致固定组织标本效果不佳[4]；(3)甲醛易氧化成甲酸，在进行固定染色时会使标本酸化，导致染色效果不佳[5]；在对陈旧组织固定时，易在组织内形成甲醛色素，从而影响病理诊断；(4)无法固定肝糖原和尿酸；(5)废液需要进行出来才能排放，处理成本较高。(6)醛类固定液在处理标本时会引发组织内蛋白质交联，不利于DNA的保存。随着对实验室环境安全要求的提高，研发没有毒性的甲醛替代品已经迫在眉睫[6]。目前国外已经在这方面有相关研究报道，但国内仍处于落后状态[7]。本文选择了国产GS固定液。GS组织标本固定脱水试剂不但能够有效软化组织，且穿透性高。在固定组织的同时还能进行脱水和脱脂。酸性溶液能够较好的保存DNA[8]。与常规制片效果相似，符合某些肿瘤分子生物学研究要求。因此其能较好应用于组织标本，无毒无害，符合环保要求。, 百拇医药(林红)