周建伟贾印峰王 丽孔 翠金呈强董海新

    1.济宁医学院附属医院检验科，山东济宁272029；2.山东省济宁市第一人民医院药学部，山东济宁272011；3.济宁医学院附属医院护理部，山东济宁272029

    2例1型糖尿病患者外周血TCR Vβ7分子结构模拟与分析

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    1.济宁医学院附属医院检验科，山东济宁272029；2.山东省济宁市第一人民医院药学部，山东济宁272011；3.济宁医学院附属医院护理部，山东济宁272029

    目的 模拟和分析2例1型糖尿病(T1D)患者外周血TCR Vβ7的结构。 方法 以荧光定量PCR熔解曲线分析技术检测T1D患者外周血TCR Vβ7的谱系漂移，利用IMGT数据库和生物信息学软件(CPH Models 2.0 Server和 RasMol 2 Software)模拟分析其分子结构。 结果 2例T1D患者外周血的TCR Vβ7拥有极为相似的氨基酸序列“CASRTAGQYEQYFGPGTR”和“CASRTAGQYEQFFGPGTR”，唯一不同的是第十二个氨基酸残基，前者为酪氨酸(Y)，后者为苯丙氨酸(F)。分子模拟显示，两者TCR Vβ7基因结构明显不同。 结论 不同T1D患者来源的TCR Vβ7即使具有相似或相同的氨基酸序列，分子结构未必相同；其可能来自于不同的T细胞克隆。

    1型糖尿病；外周血；T细胞抗原受体；结构模拟

    1型糖尿病(type 1 diabetes，T1D)是一种常见自身免疫性疾病，其发病机制尚未明确。目前，研究普遍认为T细胞在其发病机制中发挥重要作用[1-5]。随着研究的深入，最近，人们发现T细胞抗原受体可能参与了T1D的发生[6]。文献报道显示，在24个TCR Vβ基因家族中，多数患者外周血优势表达Vβ7。据此，本研究拟利用荧光定量PCR熔解曲线分析技术检测T1D患者外周血TCR Vβ7的克隆表达，并模拟分析其分子结构，为探讨T1D的发病机制提供研究支持。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    筛检2例T1D患者为研究对象(T1D-1和T1D-2患者)。两患者在参与本研究前6个月均未经系统的抗免疫治疗，未发现合并症的临床证据，均排除肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、梅毒螺旋体、结核杆菌等病原感染，以及肿瘤、自身免疫病和免疫缺陷病等。

    1.2 方法

    抽取2例T1D患者静脉血2mL，经密度梯度离心获取淋巴细胞，按照前期研究方法[10]，提取总RNA并逆转录为cDNA ......