转化生长因子β1联合生长分化因子—5体外诱导骨髓间质干细胞向类髓核细胞分化的实验研究(3)
1.6 统计学处理应用SPSS 17.0统计软件进行统计分析,结果以()表示。多个样本均数比较采用单因素方差分析,两组均数比较采用LSD-t检验。检验水准为α=0.05。
2 结果
2.1 干细胞的分离与培养
原代细胞3~4d贴壁,细胞形态以短梭形居多,少量为三角形及多边形,形态饱满,胞核明显,折光性好;15~20d达到90%融合,传至第3代,细胞形态均一、排列紧密,呈螺旋状生长。见图1。
2.2 干细胞的鉴定
流式细胞术检测BMSCs结果显示CD105、CD90、CD44、CD29均为阳性;造血干细胞标志CD45、CD34均为阴性;成熟髓核细胞标志物CD24均为阴性。见图2。
2.3 细胞外基质相关基因的表达
各组诱导14d后,采用Realtime PCR对各组Collagen type Ⅱ、Aggrecan、SOX-9基因进行定量检测,结果显示,TGF-β1(2)、GDF-5(3)、TGF-β1与GDF-5(4)三组的Collagen type Ⅱ、Aggrecan、SOX-9基因表达水平较对照组均有明显升高 ......
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