1.3 细胞形态观察

    取对数生长期各组K562细胞，接种于培养瓶，48h后分别加入10、20、40μmol/L浓度的UA，处理48h后在倒置显微镜下观察细胞形态变化并拍摄记录细胞形态。

    1.4 细胞凋亡检测

    收集四组处理后的细胞，1500rpm离心5min，弃上清，用PBS重悬细胞并计数。取1×106个重悬的细胞，1500rpm离心5min后弃上清，加入195μL Annexin V-FITC结合液轻轻重悬细胞。再加入5μL Annexin V-FITC，轻轻混匀。室温(20～25℃)避光孵育10min。1500rpm离心5min，弃上清，加入190μL Annexin V-FITC结合液轻轻重悬细胞。加入10μL碘化丙啶染色液，轻轻混匀，冰浴避光放置。流式细胞仪检测。

    1.5 细胞内ROS水平检测

    DCFH-DA自由扩散进入细胞后被酯酶催化变成DCFH，在活性氧存在的情况下被氧化成DCF，后者的荧光强度与细胞内活性氧水平成正比。收集处理后1×106个/mL细胞悬液 ......