[摘要]目的建立并验证胰蛋白酶裂解-反向高效液相色谱法进行重组艾塞那肽肽图分析研究。方法将重组艾塞那肽样品用胰蛋白酶水解，酶解所得的肽段通过反相高效液相色谱法进行分析，采用cs色谱柱，以0.1%三氟乙酸(TFA)的水溶液为流动相A，以0.1%TFA的乙腈溶液为流动相B，梯度洗脱70min，得到重组艾塞那肽肽图，以此进行方法的专属性、重现性、定量限、批间同一性研究。结果本实验室制备的重组艾塞那肽可以通过胰蛋白酶裂解RP—HPLC法进行肽图分析，专属性、重现性均满足要求，定量限为0.125mg/mL，三个批次间的肽图谱也完全一致。结论表明此方法简便可靠、准确度高、重复性好，验证研究可行，可用于重组艾塞那肽的质量控制。

    [关键词]重组艾塞那肽；肽图；胰蛋白酶裂解；高效液相色谱；方法研究；质量控制

    艾塞那肽(Exendin-4)是毒蜥唾液腺中分泌的一种胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物，为含有39个氨基酸的多肽。该产品首次由美国Amylin制药公司开发合成，目前国内市场由瑞典阿斯利康公司进口销售，在临床中已大量应用，降低餐后血糖效果好见效快，主要用于控制血糖，减轻体重，改善胰岛素抵抗。目前该药品无其他公司生产，且无药典收藏质量标准。本实验室通过前期的研发，自主构建载体，利用基因工程技术在大肠杆菌体内重组表达艾塞那肽，经过纯化、浓缩、冻干等工艺，得到重组艾塞那肽。

    目前，控制基因工程药物一致性的一个重要手段就是肽图分析(peptide mapping analysis)，肽图分析技术灵敏高效的特点使其成为对基因工程药物的分子结构和遗传稳定性进行验证的首选方法 ......