HPLC法同时测定补正片中虎杖苷、补骨脂素及异补骨脂素的含量(2)
2.2.3 阴性对照溶液制备 按补正片制备工艺各自制备虎杖和补骨脂的阴性对照制剂,操作步骤同“2.2.2”,分别制备成虎杖和补骨脂的阴性对照溶液。
2.3 专属性试验
分别取上述对照品混合液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μL,色谱条件按“2.1”进行检测,结果表明:在与虎杖苷、补骨脂素、异补骨脂素对照品相同保留时间处,阴性对照均无色谱峰,说明阴性对照均无干扰。结果如图1。
2.4 线性关系考察
精密吸取对照品混合溶液1、2、5、10、15、20、25、30μL,色谱条件按“2.1”进行检测,以进样量(μg)x为横坐标,以峰面积(mAu,sec)y为纵坐标,绘制标准曲线并进行线性回归计算,即得标准曲线回归方程分别为:虎杖苷,y=1518x-1.059,r=1;补骨脂素,y=7259x-1.357,r=1;异补骨脂素,y=5554x+4.686,r=1。
结果表明虎杖苷、补骨脂素、异补骨脂素在0.0627~1.881μg;0.01904~0.5712μg;0.0312~0.936μg的范围内,线性关系良好。
2.5 稳定性试验
取同一份补正片的供试品溶液(批号131201),分别于0、2、6、10、24和48h进样测定,对3个化合物的峰面积及其RSD进行计算,结果:虎杖苷RSD为0.4%;补骨脂素RSD为0.9%;异补骨脂素RSD为0.6%;实验提示供试品溶液在48h内基本稳定 ......
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