2—甲氧基雌二醇联用抗坏血酸诱导慢性粒细胞白血病细胞凋亡及细胞周期变化研究(2)
1 材料与方法1.1 材料和细胞培养
2-ME和AA均购自sigma公司,2-ME批号:705829,AA批号:1043003。收集已确诊的bcr/abl(+)慢性粒细胞白血病患者骨髓,应用流式细胞术分选出CML细胞,CML细胞在含有10%胎牛血清(FBS),100U/mL青霉素,100μg/ mL链霉素和2mmol/L谷氨酰胺的RPMI1640培养基中培养,并在37℃,5%CO2饱和湿度下培养。每2~3天传代1次。
1.2 细胞分组及加药
所有CML细胞随机分为四组,且按处理药物浓度分为:(1)未加药组;(2)2-ME组(2?mol/L);(3)AA组(62.5?mol/L);(4)2-ME联用AA组(2-ME:2?mol/L+AA:62.5?mol/L)。
1.3 细胞凋亡检测
收集处理的各组细胞并以1500rpm离心5min。 弃去上清液,并将细胞用PBS重悬浮并计数。 取1×106重悬细胞,1500rpm离心5min,加入195μL Annexin V-FITC结合液轻轻重悬细胞。 加入5μL Annexin V-FITC ......
您现在查看是摘要页,全文长 4544 字符。