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编号:138116
LAMP技术检测社区获得性非典型肺炎中的嗜肺军团菌感染
http://www.100md.com 2017年12月21日 中国医药科学 2017年第23期
性肺炎,定量,1资料与方法,1一般资料,2菌株来源,3主要试剂与仪器,4方法,2结果,1特异性实验,2敏感性实验,3讨论
     李辉腾 郭旭光 柯茂彬 黎卓华 磨慧玲 吴丽川 李亚东

    1.广东同江医院检验科,广东佛山528300;2.广州医科大学附属第三医院检验科,广东广州510150

    LAMP技术检测社区获得性非典型肺炎中的嗜肺军团菌感染

    李辉腾1郭旭光2柯茂彬1黎卓华1磨慧玲1吴丽川1李亚东1

    1.广东同江医院检验科,广东佛山528300;2.广州医科大学附属第三医院检验科,广东广州510150

    目的探讨环介导恒温扩增技术检测社区获得性肺炎非典型病原体嗜肺军团菌感染的可行性。方法收集195例CAP患者急性期双份合格痰液标本,一份痰液标本用作嗜肺军团菌分离培养,一份痰液标本经处理后-80℃保存至DNA提取运用LAMP技术及荧光定量PCR检测,验证LAMP试验方法的敏感性、特异性及可行性。结果195例痰培养嗜肺军团菌检出率1.54%(3/195),荧光定量PCR灵敏度达10-3/mL,检出率8.72%(17/195);LAMP方法学灵敏度达10-7/μL,检出率9.23%(18/195);两者阳性符合率94.44%(17/18),两者阴性符合率99.44%(177/178),两者总符合率99.49%(194/195)。结论采用LAMP技术检测临床痰液标本中的嗜肺军团菌具有高度的特异性和敏感性,实验时间约1.5h且操作简便,更合适基层医院开展。

    LAMP技术;社区获得性非典型肺炎;嗜肺军团菌;痰培养

    社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)是指于院外罹患的肺实质感染性严重疾病,按致病菌不同又可将疾病分为典型性与非典型性[1]。前者致病菌以肺炎链球菌最多见[2],而非典型性则以肺炎支原体、肺炎衣原体、嗜肺军团菌多见。由于嗜肺军团菌(legionella pneumophila,Lp)生长缓慢且要求严苛,因此传统的细菌培养阳性率低、操作繁琐、耗时长,难以在临床普及开展[3]。目前使用比较多检测嗜肺军团菌的方法学有荧光定量PCR、血清免疫学检测、尿抗原检测等[4-5]。本研究是采用环介导恒温扩增(loopmediated isothermal amplification,LAMP)技术原理针对嗜肺军团菌mip特异性基因设计出一套引物在一定条件下对社区获得性非典型肺炎患者临床痰液标本进行检测,现将实验报道如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    收集2016年1月~2017年6月本院及广州医科大学附属第三医院CAP患者共195例 ......

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