99mTc标记磁性纳米Fe3O4颗粒双模态探针的制备及其成像实验研究
造影剂,靶向,1实验部分,1实验材料,2SPECT,MRI双模态靶向探针的制备,3探针的细胞靶向性分析,4探针的SPECT,MRI成像实验5-6,5裸鼠体内核素浓度测定及肿瘤组织中探针的分布
杜 鹏 刘 红 姚 琦 马 倩 习 玉 峰湖北大学中药生物技术省重点实验室,湖北武汉 430062
磁性聚合物微粒是采用一定的合成方法,将具有磁性的物质和高分子聚合物反应而制成的一种新型聚合物材料。可以获得具有长血液循环时间的磁性氧化铁纳米颗粒,也可以通过与特定的配体或受体的偶联结合,从而获得功能更为复杂的磁性氧化铁纳米颗粒MRI分子影像探针[1,15]。Fe3O4纳米颗粒以其超顺磁特性在磁共振成像(MRI)中表现出独特的造影剂功能,并具有良好的生物安全性和表面可修饰性等诸多优点,因此磁性纳米颗粒在生物医学上展现出巨大的应用价值[2]。造影剂可以增强信号对比度和提高软组织图像的分辨率,用于恶性肿瘤的早期诊断及鉴别。在影像医学研究中Fe3O4纳米颗粒已成为最受青睐的MRI造影剂[3]。
本实验室已经合成与表征了具有一定超顺磁性,粒径分布均匀的Fe3O4纳米微粒,本文中主要选用此颗粒为核心,在其表面偶联上99mTc(锝)和RGD小肽,制备SPECT/MRI双模态探针。主要考察该双模态探针应用于裸鼠模型的SPECT/MRI成像,研究其在体内体外的靶向行为。
1 实验部分
1.1 实验材料
二亚乙基三胺五乙酸二酐(DTPA二酐),Tween-20分析纯,透析袋(mw,8000~ 14000),均由国药集团化学试剂有限公司;羧基聚乙二醇(mw,2000)(HOOC-PEG-COOH)、氨基聚乙二醇(mw,2000)(HOOC-PEG-NH2)、DMSO 和 RGD小肽(C(RGDyK))均由炎怡生物技术公司提供;超净台、CO2培养箱,Therome公司;正置荧光显微镜DM2500,Leica(德国)公司;3T Trio 磁共振成像仪系统,西门子(德国)公司;SPECT/CT,Bioscan(美国)公司;烘箱LC-213,上海爱斯佩克环境设备有限公司;电子天平PB602-N,METELER TOLEDO公司;超声波清洗器USC-202,上海波龙电子设备公司;高速离心机Microfuge 16,BECKMAN COULTER公司;动态光散射(DLS)仪、粒度分析仪Nano-ZS,Malvern公司;γ放射免疫计数器GC-1200,中佳光电公司;超滤管HyClone(美国)公司;Milli-Q 纯水系统制备溶液配置用水。人肺癌H1299细胞株、裸鼠BALB/C-nu购自上海斯莱克动物实验有限公司。
1.2 SPECT/MRI双模态靶向探针的制备
1.2.1 Fe3O4@PEG-DTPA-RGD的制备及DLS测量颗粒的水力学尺寸 (1)配制15mL混合液(HOOC-PEG-NH21mL ......
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