张 凡 赵 远 曹丽娟 姜恒丽 贾天柱▲

    1.辽宁中医药大学药学院，辽宁大连 116600；2.辽宁省中药炮制工程技术研究中心，辽宁大连 116600；3.上药康丽(常州)药业有限公司，江苏常州 213100；4.盛实百草药业有限公司，天津 300301

    四君子汤首载于《太平惠民和剂局方》，组方为人参、麸白术、茯苓、炙甘草，是益气健脾，为治疗脾胃气虚证的基础方剂[1]。生脉饮首载于《医学起源》，组方为人参，麦冬，五味子，功效为益气生津，敛阴止汗，多用于心血管疾病的治疗[2]。在原方中四君子汤是以生晒参纳入方剂用药的，而生脉饮中则是以红参纳入方剂的。人参作为百草之王，有多种炮制品，常用的炮制品为生晒参和红参。生晒参经过蒸制而得红参，在炮制过程中活性成分发生了量变和质变[3]。在临床应用方面，生晒参多用于补气生津，治疗气阴不足，津伤口渴等症，以清补为佳； 红参则味甘性温，以温补为主，常用于治疗体虚欲脱，肢冷脉微，气不摄血等症[4]。药效学显示，四君子汤和生脉饮均有一定的免疫调节的作用[5-6]，但在四君子汤和生脉饮中，这两种方剂的原方选择不同的人参炮制品入药，其原理并没有相关报道，故在本实验中先应用CCK-8法测定RAW264.7细胞存活率来筛选给药浓度，ELISA 法检测细胞培养液中NO、ROS、TNF-α的含量来评价免疫效果，进而从体外细胞效应角度评价人参生熟饮片对四君子汤和生脉饮对免疫调节的差异，确定四君子汤中最佳的人参炮制品种。故本实验以不同的侧重点，将不同饮片纳入相同方剂，将相同饮片纳入不同方剂，以期找出差别，说明原理，进而从方剂层面说明人参的生熟差异，为人参在临床使用中提供科学依据，促进人参的合理用药提供科学依据[7]。

    1 材料与方法

    1.1 药材

    人参鲜品购自辽宁省桓仁县，对照2010版中华人民共和国药典鉴定为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey)的根。各人参炮制品由辽宁省中药炮制工程技术研究中心制备。白术(购自安徽济人药业有限公司，批号：111018)，茯苓块(购自安徽济人药业有限公司，批号：120716)，甘草(购自安徽济人药业有限公司，批号：120608)，麦冬(购自安徽济人药业有限公司，批号：120506)，五味子购自丹东大梨树五味子GAP基地。

    1.2 试剂

    DMEM高糖培养基(Thermo公司)；胎牛血清(Thermo公司)；胰酶、EDTA (Reanta公司) 青霉素、链霉素双抗(Thermo公司)；中性红粉末(上海哈灵生物医药科技有限公司)；HANKS液(上海哈灵生物医药科技有限公司)；CCK-8试剂盒 (上海哈灵生物医药科技有限公司)； NO、ROS、TNF-αELISA试剂盒(上海哈灵生物药业有限公司)；DMSO 为ACS级；75%医用消毒酒精；小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7细胞株(由美国模式培养物集存库ATCC提供) ......