曹霞飞 何华红 吴 婷 李志芳

    1.广州市食品检验所，广东广州 511405；2.广州市药品检验所，广东广州 510160

    湿润烧伤膏是一种用于各种烧、烫、灼伤的局部给药制剂，起到清热解毒、止痛、生机的作用，其组分中含有黄连、黄柏、黄芩等多种中药成分[1-3]。《中国药典》明确规定，用于手术、烧伤及严重创伤的局部给药制剂应符合无菌检查法规定[4-6]，且应严格控制其中的内毒素含量。目前《中国药典》尚未收载该品种的内毒素检查法。本文对该供试品细菌内毒素检查方法进行探讨，建立可行性方法，为该品种质量标准的完善和提高提供实验依据。

    1 材料与试剂

    1.1 仪器

    MS-1型自动漩涡震荡器(德国IKA)；TW12型六孔水浴箱(日本Julabo)；LK164-03型内毒素定量仪(美国Lab Kinetice Ltd.)；XS204型分析天平(美国 Mettler Toledo.)。

    1.2 试剂

    湿润烧伤膏：批号20140704，汕头美宝制药有限公司。鲎试剂(TAL)：批号1309222，湛江安度斯生物有限公司；批号13030612，福州新北生化工业有限公司；细菌内毒素标准品：中国药品生物制品检定所，批号150601-201377，规格70EU/mL；细菌内毒素检查用水(BET水)：湛江安度斯生物有限公司，批号1303290，规格50mL/支。

    2 方法与结果

    2.1 鲎试剂灵敏度复核试验[6-7]

    按照2015年版《中国药典》(四部)通则细菌内毒素检查法规定，进行鲎试剂的标示灵敏度复核。取细菌内毒素工作标准品一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，再用砂轮在瓶颈上部轻轻划痕，用75%酒精棉球擦拭后启开，防止玻璃屑落入瓶内。按细菌内毒素工作标准品的使用说明书，用移液管加入1mL的细菌内毒素检查用水，溶解其内容物，用封口膜将瓶口封严。置自动漩涡混合器上混合30min，即为70EU/mL内毒素标准溶液。然后再稀释制成 0.5、0.25、0.125和 0.06EU/mL 四个浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在漩涡混合器上混匀30s。具体的稀释过程如下：取0.4mL内毒素标准溶液加上3.6mL BET水即为1∶10稀释液，得到7EU/mL内毒素标准溶液。取1mL的1∶10稀释液，加上6mL BET水即为1∶70稀释液，得到1EU/mL内毒素标准溶液 ......