调节胆汁酸代谢及肠道菌群对非酒精性脂肪肝治疗效果研究
匀浆,1材料与方法,2方法,3统计学处理,2结果,1各组小鼠一般状态,2各组生化指标比较,3各组小鼠肝组织匀浆检测结果分析,4各组小鼠肠道菌群检测结果分析,3讨论
王 菲 王允野 张 丹 赵晓茹 刘 昆吉林医药学院附属医院消化内科,吉林吉林 132013
随着人们饮食结构、生活习惯的改变,非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的发病率逐年上升且呈低龄化,已成为我国乃至全球肝硬化的最主要病因之一。NAFLD 多同时伴有其他代谢性疾病,如肥胖、高脂血症、2 型糖尿病等。目前其发病机制尚未完全明确,可能与胰岛素抵抗、氧化应激及脂质过氧化损伤等机制有关[1],临床治疗上多采用降血脂、保肝、控制饮食、运动等方式,但患者依从性差,难以长期坚持。近些年,多项研究表明NAFLD 与饮食、胆汁酸水平以及肠道菌群有密切关系[2],通过调节饮食- 胆汁酸- 肠道菌群来治疗NAFLD 是目前提出的新的治疗途径,其效果如何目前缺乏实验研究,本研究应用抗生素、高脂饮食制造非酒精性脂肪肝病模型,并随机分组给予益生菌、调节胆汁酸治疗,观察比较其疗效,为NAFLD 治疗方案提供进一步实验理论支持。
1 材料与方法
1.1 材料
2017 年9 月~2018 年4 月选取SPF 级BALB/c小鼠72 只,雌雄各半,由吉林医药学院动物实验中心提供,体重(18±2)g。头孢曲松钠(湖南科伦制药有限公司,H20065642)1.0g/ 支,配成按100mg/kg 给药。高脂饲料:82.5% 普通饲料,2% 胆固醇,10%猪油,5% 蛋黄粉、0.5% 三号胆盐组成[3]。益生菌选用枯草杆菌二联活菌(北京韩美公司,S20030087)。熊去氧胆酸(德国 Dr.Falk 公司,H20181059),配成10μmol/L 溶液,胃管灌入。采用全自动血清生化仪(荷兰SelcetraXL)及南京建成生物科技有限公司试剂盒进行测试。
1.2 方法
1.2.1 实验第一部分方法 随机选取小鼠40 只,随机分为四组。10 只小鼠采用普通饲料喂养,为Ⅰ组;10 只采用高脂饲料喂养,为Ⅱ组;另外选择10只小鼠给予普通饲料喂养,并给予头孢曲松钠每日2 次经口灌入,为Ⅲ组。另10 只小鼠采用高脂饲料喂养,同时应用头孢曲松钠每日2 次经口灌入,为Ⅳ组。喂养12 周后,深度麻醉小鼠,摘眼球取血,化验甘油三酯、胆固醇、丙氨酸氨基转移酶、谷氨酰氨基转移酶、脂联素,收集小鼠粪便应用胆汁酸试剂盒检测胆汁酸水平,无菌取回盲部粪便进行肠道菌群培养进行比较,处死后称取全肝湿重并记录,取肝组织制成10% 肝匀浆,应用匀浆器匀浆 ......
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