崔立山 林 婷 张健莉 冯三平 曹 洋 曹 颖 吴德龙 苏 砍 刘金凤

    1.厦门市第五医院神经外科，福建厦门 361101；2.厦门大学医学院基础医学部，福建厦门 361102；3.厦门市第五医院神经内科，福建厦门 361101；4.厦门市中医院药剂科，福建厦门 361101

    神经胶质细胞瘤约占原发性脑肿瘤的70%，且恶性肿瘤居多[1-3]。垂体瘤转化基因1(pituitary tumor-transforming gene，PTTG1)是一种常见致癌基因在多种肿瘤细胞中高表达，如结肠癌SW480，肝癌HepG2、Huh7，乳腺癌MCF-7以及卵巢癌SKOV3等[4-9]，然而其对胶质瘤以及胶质瘤细胞血管生成拟态和细胞周期的影响未见报道。

    本研究使用PTTG1 siRNA转染SHG44细胞沉默PTTG1基因，研究PTTG1表达降低对恶性胶质瘤细胞血管生成拟态和细胞周期的影响，同时探究PTTG1调控细胞周期的可能机制，从而为胶质瘤的临床治疗提供新的思路。

    1 材料及方法

    1.1 一般材料

    SHG44细胞株(厦门大学眼科所馈赠)；胰蛋白酶、胎牛血清、DMEM高(美国赛默飞世尔公司)；PTTG1 siRNA、阴性对照siRNA及转染试剂(中国锐博生物科技有限公司)；逆转录试剂盒(瑞士罗氏公司)；Trizol(美国赛默飞世尔公司)；SYBR Premix Ex TaqII(宝日医生物技术有限公司)；BCA蛋白定量试剂盒(美国赛默飞世尔公司)；PVDF膜(美国赛默飞世尔公司)；羊抗鼠二抗、羊抗兔二抗(杭州联科生物技术股份有限公司)；过硫酸铵(AP)、30%聚丙烯酰胺凝胶、牛血清清蛋白(BSA，中国索莱宝公司)；蛋白抗体(美国赛默飞世尔公司)；ECL化学发光法检测试剂盒(中国索莱宝公司)；基质胶基底膜基质(美国康宁公司)；PI细胞周期检测试剂盒(美国西格玛公司)。

    1.2 仪器

    T-Gradient梯 度 PCR 仪(德 国 Biometra公司)；7300型荧光实时定量PCR仪(美国ABI公司)；PowerPac Bio-rad电 泳 系 统(美 国 伯 乐 公司)；IS4000R全自动图像工作站(美国柯达公司)；Multiskan FC多功能酶标仪(美国赛默飞世尔公司)；Beckman Gallios流式细胞仪(美国贝克曼库尔特有限公司)；Olympus IX51倒置显微镜(日本奥林巴斯公司) ......