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编号:119938
BCA-1通过ErK信号通路促进高糖环境下人脂肪间充质干细胞增殖和迁移
http://www.100md.com 2020年11月21日 中国医药科学 2020年第19期
培养基,1材料与方法,1一般材料,2方法,3统计学分析,2结果,1BCA-1促进hAdMSCs增殖,2BCA-1促进hAdMSCs迁移,3BCA-1促进hAdMSCs中PI3K,MAPK蛋
     孙石柱 王璐璐 姚立杰 张善强 王 冠 李永涛 刘丹阳 沈 雷

    齐齐哈尔医学院基础医学院解剖学教研室,黑龙江齐齐哈尔 161006

    糖尿病及其并发症已经成为影响社会发展进步的重要慢性疾病[1]。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)适合糖尿病等造成的多种组织损伤的修复,是公认的细胞治疗领域首选细胞[2]。研究发现,高血糖环境导致MSCs活性降低[3]。脂肪中存在的脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,AdMSCs)具有容易获取等特征[4]。如果在高糖环境下促进hAdMSCs增殖或迁移能力的提高,将有利于hAdMSCs在再生医学的应用。

    B淋巴细胞化学引诱物-1(B-lymphocyte chemical attractants-1,BCA-1)对肿瘤细胞具有很好的促进增殖作用,还具有抗免疫、招募肿瘤细胞归巢的效果[5]。研究发现,MSCs具有很低的免疫原性,并能逃避宿主免疫系统监视[6],BCA-1可能对MSCs也发挥逃避免疫的作用。研究发现BCA-1可以促进MSCs分化为成骨细胞[7],说明MSCs表面有BCA-1的相应受体。虽然缺氧环境下BCA-1能够促进人骨髓间充质干细胞的增殖或自噬[8],但是在高糖环境下的相关研究还鲜见报道。

    本实验在细胞高糖模型下,观察BCA-1刺激的hAdMSCs增殖和迁移的情况,并揭示其作用的分子机制,为hAdMSCs在组织工程或再生医学的进一步应用奠定研究基础。

    1 材料与方法

    1.1 一般材料

    人脂肪间充质干细胞(广州赛业生物科技有限公司);人BCA-1重组蛋白和人VEGF蛋白ELISA试 剂 盒(美 国R&D公 司);PD98059(Cell Signaling公司);细胞增殖试剂盒(CCK8,日本同仁公司);α-MEM培养基、胎牛血清(fetal bovine serum,FBS,美国Thermo Fisher公司);多聚甲醛、结晶紫和葡萄糖(上海生工公司);青-链霉素、苯甲基磺酰氟(phenylmethylsulfonyl fluoride,PMSF)、RIPA细胞裂解液、二喹啉甲酸(bicinchoninic acid ......

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