蒙药蜀葵花DNA条形码分子鉴定技术鉴定与功效组分含量测定
草素,木犀,槲皮素,1仪器与材料,2方法与结果,1matK序列测定,2功效组分含量测定9-10,3讨论
陈玉花 肖田梅 白梅荣 白迎春 包桂花1.内蒙古民族大学化学与材料学院,内蒙古通辽 028007;2.内蒙古民族大学蒙医药学院,内蒙古通辽 028007
蜀葵花是蒙医临床常用于治疗各种水肿的蒙药材,为锦葵科蜀葵(Althaea rosea L.)Cavan.的干燥花,异名哈鲁其其格、哈鲁莫德格、炮扎木[1]。该药味咸、甘,性寒;具有利尿,消肿,清肾和膀胱热,固精,调经等功效;主要用于水肿肾热、膀胱热、遗精、月经不调等症[2]。收载于《内蒙古蒙药材标准》(1987年版),据研究资料显示,木犀草素、山奈素及槲皮素等黄酮类成分是蜀葵花发挥其利水作用的功效成分。但目前,对蜀葵花含量测定及鉴定研究报道较少见[3-4],尤其未见采用脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)条形码技术进行鉴定的相关报道。DNA条形码分子鉴定技术是利用一个或几个标准DNA序列实现对物种的分类与鉴别[5-8]的近年来新兴的技术。该方法由于其简便、通用性高、稳定性好、不受生长环境和生长发育阶段的限制等特点被广泛用于分子系统学和物种鉴定[9-12]、生物多样性和生态学等研究,是传统鉴定方法的有效补充[13],这为锦葵科蜀葵植物的快速鉴定提供了可能。因此,本实验采用DNA条形码分子鉴定技术对进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增并测定标记(matK) 序列的同时应用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定蜀葵花功效组分槲皮素、木犀草素和山柰素的含量,以期为蜀葵花的质量标准研究提供依据。
1 仪器与材料
JY200C型电泳仪(北京六一生物科技有限公司,批号:DYCZ-24DN)、JY-SPC型电泳槽(北京六一生物科技有限公司,批号:DYCZ-24DN)、Multigene Gradient PCR仪(北京信众和科技有限公司,批号:20162228)、QUANTUM凝胶成像系统(北京五洲东方科技发展有限公司 ......
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