黄秀芳 原向伟 秦 英 向珊珊 陈忠羡

    1.中山大学附属江门医院 广东省江门市中心医院病理科，广东江门 529030；2.中山大学附属江门医院 广东省江门市中心医院脊柱骨科，广东江门529030

    在骨组织原发恶性肿瘤中，骨肉瘤发病率最高，常早期出现肺部转移，预后不良。术前术后新辅助化疗联合外科手术是骨肉瘤的主要治疗方式，但常因为耐药或毒副作用导致化疗失败，从而使患者丧失手术机会或肿瘤复发，甚至丧失生命[1]。干扰素作为生物治疗方式之一，已被用于多种恶性肿瘤的治疗，还可与传统化疗药物协同治疗恶性肿瘤，增强化疗敏感性[2]，但相关研究在骨肉瘤罕见报道，因此本文设计α干扰素(interferon-α，IFN-α)与顺铂(cisplatin)联合处理骨肉瘤细胞U2OS(p53正常)和MG63(p53突变)，观察其抗肿瘤效应，并分析其分子机制，现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 细胞培养与试剂

    骨肉瘤细胞U2OS(p53基因正常，ARF基因启动子甲基化[3])和MG63(p53基因突变，ARF基因纯合缺失[3])来自中山大学病理教研室，培养液为含10%胎牛血清、100 μg/ml链霉素和100 U/ml青霉素的DMEM，5%CO2培养箱37℃培养。Opti-MEM、Lipofectamine 2000、TRIzol购于Invitrogen公司。dNTP、Taq酶等PCR试剂购自上海申能博采，RNASIN、M-MLV为Promega产 品。IFN-α为Peprotech产品(300-02AB)，顺铂(479306-1G)、MTT、碘化丙啶(PI)均为Sigma产品，本研究全部抗体均来自Santa Cruz。

    1.2 MTT法检测细胞活力

    96孔板加顺铂 ......