周乃强 赵世元 梁晓坤

    广西壮族自治区崇左市人民医院神经内科，广西崇左 532200

    帕金森病(Parkinson's disease，PD)是一种神经损伤和黑质多巴胺神经元进行性损伤导致运动功能障碍的神经系统疾病。帕金森病表现为静止性震颤、僵硬、运动迟缓和逐渐失去正性反射。左旋多巴是治疗帕金森病的主要药物[1]。在帕金森病中，中脑小胶质细胞的过度激活触发了毒性和非记忆性介质的合成，如诱导型一氧化氮和环氧合酶-2(COX-2)，并释放自由基，而自由基反过来又导致了人类和动物模型中多巴胺神经元的凋亡[2]。在病理条件下，氧化应激可刺激细胞内信号转导途径，使单核细胞产生大量炎症介质从而促进炎症反应的发生，在帕金森病发生发展过程中伴随着炎症反应[3]，因此靶向抗炎治疗也可作为治疗帕金森病的一种治疗策略。

    课题组前期实验表明：石仙桃多糖能抑制大鼠气道平滑肌细胞增殖[3]。石仙桃多糖对肺炎支原体肺炎模型小鼠有较好治疗效果[4]。本研究将在帕金森动物整体模型基础上，采用电镜、酶联免疫技术、分子生物学等技术，观察石仙桃多糖抗氧化损伤和神经保护作用，为石仙桃多糖开发提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验药物(石仙桃多糖)的提取

    石仙桃多糖(PCLP)的提取参考文献[5]。取石仙桃鳞茎，洗净晒干。1 kg加4 L蒸馏水80℃回流6 h，冷却后加1倍体积95%乙醇沉淀，用丙酮和乙醚萃取沉淀物3次，Sevag法去除蛋白，用95%乙醇沉淀，再将沉淀物水解、醇沉，用丙酮和乙醚脱水，重复操作数次，得石仙桃多糖。经高效色谱检测，在260～280 nm无吸收峰，收集多糖。样品真空包装、冰箱冷藏保存。

    1.2 实验动物

    120只SPF级雄性SD大鼠，体重200～220 g，由湖南斯莱克景达实验动物技术有限公司提供，动物许可证号SCXK(桂)2016-0002。大鼠均饲养在22℃、相对湿度为30%且无病原体环境下，单笼喂养，自由进食，自由活动。动物适应2周后可以进行实验。实验严格遵守动物伦理委员会的法律法规，实验均符合动物行为规范。小鼠腹腔注射MPTP 20 mg/kg，每晚1次，连续5 d。行为测试应在最后一次注射MPTP后3天进行。

    1.3 主要试剂

    6-羟基多巴胺(6-OHDA，美国Sigma公司，批号：20181203)；丙二醛(MDA)试剂盒(碧云天生物技术公司，批号：2019082101)；一抗酪氨酸羟化酶(TH)多克隆抗体(美国Santa Cruz公司 ......