王文丽 李金诺 刘 阳 李友瑞

    滨州医学院附属医院口腔修复科，山东滨州 256603

    牙列缺损和牙列缺失是口腔临床中常见的疾病，随着临床治疗技术及生物材料应用的发展，种植义齿已成为诸多缺牙患者首选的修复方式。植入位点充足的牙槽骨量是实现种植体骨结合、保证种植修复远期疗效的先决条件[1]。然而，临床患者的缺牙区常伴有因外伤、根尖周炎、牙周炎等原因导致的骨缺损[2-3]。山柰酚是一种黄酮类化合物，广泛存在于蔬菜、水果和草本植物中，如甘蓝、山楂和山柰等，具有抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、神经保护以及预防骨质疏松等功效[4]。近年来，山柰酚在防癌抗癌、预防骨质疏松等方面的研究较多，但在口腔领域中的应用研究较少。基于此，本研究通过体外细胞实验探讨不同浓度的山柰酚对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)增殖和成骨分化的影响，以期为种植体周围骨缺损的治疗提供新思路。

    1 材料与方法

    1.1 细胞与试剂

    BMSCs 购于中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。山柰酚、DMEM 培养基、青链霉素购于美国Sigma 公司；胎牛血清购于澳洲Clark 公司；CCK8 试剂盒、碱性磷酸酶活性检测试剂盒、茜素红染色试剂盒及实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR)试剂盒均购于上海碧云天生物技术有限公司。

    1.2 山柰酚溶液配制

    用电子天平称量0.57 mg 山柰酚，溶解于10 μl的二甲基亚砜中，将完全溶解的山柰酚溶液移至50 ml离心管内，加入20 ml 的完全培养基混匀，配制成含有10-4mol/L 山柰酚的完全培养基，将其过滤除菌作为母液。其后分别取10-4mol/L 山柰酚母液加入一定量的完全培养基依次稀释至10-5、10-6、10-7、10-8mol/L ......