王柏莲 林 青 林慧珍 蒋诚传 廖 瑜 潘慧颖 李泰阶

    广西医科大学附属武鸣医院医学检验科，广西南宁 530199

    科学技术的发展带动了医学技术的进步，临床微生物学检验经历了漫长的手工鉴定过程，从经典手工鉴定到全自动微生物鉴定再到如今的质谱鉴定时代，实现了革命性的飞跃。广西医科大学附属武鸣医院是武鸣区唯一的一所三级甲等医院，承担着武鸣区内几所医学院校的大专生、本科生的实习带教工作，这些学生毕业后很多就业于基层医院或一些检测仪器设施不够完善的小型医院，大部分基层医院并未配置质谱仪，其检测能力尚待提高，而如何在当今的质谱时代下，让学生既能掌握质谱快速鉴定微生物技术，又能牢固掌握经典微生物鉴定方法(形态学及生理生化学)，并利用经典鉴定方法与质谱鉴定技术的结合，提高对苛养菌、厌氧菌和罕见菌的认知，使学生能够从容地走向工作岗位，这是一个值得探索的问题。

    1 质谱技术原理以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术鉴定微生物为例

    微生物的主要生物活性物质是蛋白质和核酸，核酸决定蛋白的表达，蛋白的表达决定生物体表型。基于蛋白质指纹图谱进行的微生物鉴定,相比核酸水平进行的鉴定更为准确和直接[1]。MALDITOF MS 技术通过对微生物蛋白质的解吸分析达到对微生物鉴定和分型目的。其检测原理是基质与微生物蛋白质形成共结晶体，共结晶体在激光照射下，发生解吸和电离，菌体蛋白质发生离子化，带电离子在电场作用下进入飞行时间检测器，离子依质荷比不同而分离，最终在飞行管末端检测到每个离子峰度，形成指纹图谱。通过软件对这些指纹图谱进行处理并和数据库中已知微生物标准图谱进行比对，达到鉴定微生物目的[2]。

    2 MALDI-TOF MS技术在微生物鉴定中的优势与局限

    近年来，MALDI-TOF MS 是在微生物鉴定领域方面发展迅速的一种新型鉴定技术 ......