李育芬 廖斌 冯瑞琳 刘芳芳

    (昆明市疾病预防控制中心 云南 昆明 650228)

    采用HIV耐药检测了解患者的HIV耐药性，对治疗艾滋病患者和控制疫情十分重要。常用检测方法有基因型和表型耐药检测，基因型耐药检测是间接法，针对已被证实的突变位点，不能发现潜在的耐药突变点，不能解释多种耐药突变位点的协同吉抗效应。表型耐药检测可克服其不足，准确检测HIV病毒的耐药性。本文对HIV-1表型耐药检测方法学进展作一综述。

    1.HIV-1表型耐药检测原理

    美国食品和药品管理局批准用于HIV抗病毒治疗药物分三类：蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂和融合抑制剂。HIV表型耐药检测就是针对这些药物而进行。

    表型耐药检测是病毒耐药性分析的标准方法，运用体外药敏分析法，在逐渐增加药物浓度下对HIV复制能力直接评价。结果以50%抑制浓度(IC50)来表达，并与同类野生株的IC50或临界值(CUT-OFF值)相比，通过其倍数改变评价耐药程度[1]。

    2.常用的HIV-1表型耐药检测方法

    2.1 传统表型耐药检测方法(即标准表型检测)

    其实质是体外药敏试验，从病人体内分离外周血单核淋巴细胞(PBMC)，与植物血凝素(PHA)刺激正常人的PBMC共培养，分离出病毒株并计算其50%组织培养感染计量(TCID50)，用一定的病毒量(1000 TCID50)体外感染PHA活化的正常人PBMC，在梯度稀释的药物浓度下孵育病毒，7天后用ELISA法检测上清液中P24抗原量，以此计算IC50，与野生株IC50或cut-off值进行比较得出病毒株的耐药程度[2]。该法检测的病毒是通过分离培养患者PBMC获得 ......