叶励超

    (福建医科大学附属第二医院 福建 泉州 362000)

    实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)是当前临床研究多发性硬化疾病的理想动物模型，主要应用同种的中枢神经系统白质抗原及其类似物诱导而成，其发病机理与病理表现均和多发性硬化相似，病变核心均为免疫反应性炎症。目前已有大量研究证实[1]，白介素-17、白介素-23在多发性硬化并发生、发展中发挥了重要的作用。也有研究报道[2]，维生素D在体内经肝脏、肾脏羟化后可形成1-25二羟基维生素D，进而起到免疫调节作用，适用于多发性硬化的防治。本研究拟建立维生素缺乏和补充的EAE小鼠模型，通过观察EAE发病前期、急性进展期和慢性期小鼠神经功能、IL-17阳性细胞表达差异，进而探析维生素D对EAE小鼠病情进展的影响。

    1.实验材料

    1.1 实验动物

    SPF级C57BL/6小鼠，雌性6周龄，体质量20～25g，共48只，购自重庆腾鑫生物技术有限公司。

    1.2 实验饲料与试剂

    维D缺乏饲料(购自江苏特洛菲饲料公司)，维生素D饲料自行制作(先将维生素D溶解于无水乙醇中，制备成1mg/ml的溶液备用，同时将琼脂溶解于蒸馏水中制成1%的溶液经加热煮沸后加入不含有维生素D的合成饲料，搅拌均匀，并在琼脂溶液完全凝固之前，将维生素D溶液加入并混匀，制备成含有维生素D的饲料)。维生素D(购自上海生工)，免抗小鼠IL-17多克隆抗体、山羊抗兔IgG(美国Sigma公司)，完全弗氏佐剂(美国Sigma公司提)，百日咳霉素(美国Sigma公司)，MOG35-55(上海翊圣生物)等。

    2.方法

    2.1 实验分组方法

    将48只小鼠随机分6组 ......