从罗非鱼皮中提取与纯化非变性胶原蛋白的方法的研究
盐析,溶性,材料与方法,实验结果与讨论,结论
王月林 何兰 郭休玉 陆雪荣(上海市水产研究所水产品加工与饲料研究室 上海 200433)
天然高分子胶原来源广泛,可以从陆生动物如猪、牛的皮、骨、腱等部位获取,也可以从水生动物中如鱼皮鳞中获取。由于陆生生物安全性问题日益受到人们的关注,很多国家和地区都限制了陆生生物来源胶原蛋白制品的使用范围,而水生生物的皮、骨、鳍等含丰富的胶原蛋白, 被国内外学者认为是安全的胶原蛋白来源。本项目组以水产加工废弃物罗非鱼皮为原料,通过原料前处理、胶原提取、胶原纯化等方法的研究,探讨罗非鱼皮非变性胶原蛋白的产业化路线。
1.材料与方法
1.1 原料前处理
1.1.1 从水产养殖厂购买新鲜罗非鱼皮,清洗去鳞取皮,去除附着鱼肉和鱼鳍,切成2cm*2cm小块,备用。
1.1.2 适量浓度的NaCl溶液清洗鱼皮,料液比1∶10(w/v),4 ℃以下,每隔12hr更换一次溶液,重复4次。
1.1.3 再更换0.1mol/L的NaOH溶液清洗鱼皮,料液比1∶10(w/v)4℃以下,每隔12hr更换一次碱液,重复4次,再用去离子水反复清洗至pH6.5~7。
1.2 提取粗胶原
1.2.1 酸溶性胶原的提取 将前处理后的鱼皮放入0.5mol/L的乙酸溶液中,料液比1∶20(w/v),缓慢搅拌6hr后,过滤,取上清。重复上述酸溶步骤一次,合并滤液获得酸溶性胶原ASC(acid-soluble collagen)。
1.2.2 酶溶性胶原的提取 1.2.1中过滤所得滤液中加入0.2%的胃蛋白酶 ......
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