淡色库蚊的弓形虫实验感染初报
新乡,资料与方法,1实验动物,2实验材料,3实验方法,结果,1血涂片镜检,2定性检测,3定量检测,讨论
谷晨阳 李雅菁 赵奕涵 张学顺 冯苗 刘世国(1 新乡医学院第一临床学院 河南 新乡 453003)
(2 新乡医学院第三临床学院 河南 新乡 453003)
(3 新乡医学院人体寄生虫教研室 河南 新乡 453003)
弓形虫是寄生于温血类动物和人类有核细胞内的寄生原虫,在世界范围内广泛分布,人类普遍易感,全世界将近三分之一的人感染弓形虫[1]。弓形虫感染途径有多种:生食或半生食肉类或饮用卵囊污染的水源,胎儿可经孕妇经胎盘导致感染[2]。
蚊属于双翅目、蚊科,是对人类威胁最大的卫生媒介昆虫。蚊能兼吸人和动物的血,能传播多种人兽共患疾病,如常见的疟疾、丝虫病、流行性乙型脑炎、黄热病和登革热等疾患[3]。蚊虫有多种,常见的有按蚊,库蚊和伊蚊,其中,淡色库蚊是北方地区夏季的优势吸血蚊种[4-5]。
蚊子在弓形虫传播中的作用至今尚未知晓。我们采用RH株弓形虫建立小鼠弓形虫感染模型。同时饲养当地优势蚊种-淡色库蚊,待雌蚊羽化交配后叮咬吸取弓形虫感染小鼠血液,其后检测吸血雌蚊体内弓形虫DNA。现将实验结果报道如下。
1.资料与方法
1.1 实验动物
淡色库蚊孑孓由野外捕捉。8周龄昆明小鼠由新乡医学院动物中心提供;RH株弓形虫速殖子为新乡医学院寄生虫实验室液氮保存的RH株种。此实验过程及动物使用、护理方案通过了新乡医学院动物伦理使用委员会的批准。
1.2 实验材料
饲养笼(35cm×35cm×35cm,120目),电动吸蚊器、透明塑料杯、葡萄糖、小白鼠饲料、海绵、塑料盆等均为市售;2×UltraSYBR Mixture(High ROX)、2×Es Taq MasterMix(Dye)均购自北京康为世纪生物科技有限公司,蛋白酶K缓冲液购自美国Genview公司,Tris饱和酚购自北京索莱宝科技有限公司。
1.3 实验方法
1.3.1 淡色库蚊的养殖 采用标准化养殖方法[6],饲养条件为室温(25±2)摄氏度,相对湿度为(65±15)%,光照周期为L∶D=14h∶10h。
1.3.2 弓形虫小鼠感染模型的建立 RH株弓形虫速殖子1×105个腹腔内注射感染小鼠 ......
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