尪痹片对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中的成骨标志物的影响研究
磷酸酶,甲氨蝶呤,资料与方法,1药物与试剂,2实验仪器,3含药血清的制备,4细胞培养,5MTT法检测细胞增殖率,6茜素红染色法检测成骨矿化情况,7碱性磷酸酶测试盒测试碱性磷酸酶活性,统计学方法
刘益臻 李立章 王炎 付坤飞(贵州中医药大学 贵州 贵阳 550001)
尪痹片由著名国医大师焦树德教授创立,是国家六类新药痹病系列药之一,为中华中医药学会风湿病分会协定处方,临床用于治疗类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)疗效显著,病理研究和临床研究均表明该药可减轻骨破坏程度,促进骨形成[1,2],骨形成的重要细胞为成骨细胞,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)可分化为成骨细胞[3],因此本研究使用尪痹片含药血清体外干预骨髓间充质干细胞,探讨其对成骨分化的保护作用。
1.资料与方法
1.1 药物与试剂
尪痹片,仙灵骨葆胶囊,甲氨蝶呤片,SD大鼠骨髓间充质干细胞株(中国科学院),成骨分化培养基,茜素红,肿瘤坏死因子α,TNF-α,一步法快速WB(HRP)试剂盒,高灵敏度化学发光检测试剂盒,蛋白膜印迹再生液,TRNzol总RNA提取试剂,PrimeScript ? RT reagent Kit with gDNA Eraser,SYBR?Premix Ex Taq ? Ⅱ,ROX plus,DL2,000 DNA Marker,康为世纪SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(CW0022),碱性磷酸酶(AKP)测试盒。
1.2 实验仪器
No:164-5050电 泳 仪,Mini-PROTEAN Tetra Electrophoresis System蛋白电泳槽 ......
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