曹建佳 王开翔 黄贵闽 曹贵华 刘光涛 何祥彪

    (乐山市人民医院泌尿外科 四川 乐山 614000)

    肾癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，每年全世界有超过100,000例患者因此死亡。目前，肾癌的治疗手段很有限，RCC治疗仍靠外科手术，晚期治疗非常棘手。随着基因靶向治疗近年来在临床肿瘤诊断和治疗领域的开展并取得良好应用，因此，本实验将研究方向集中在肾细胞癌的基因靶向治疗。

    Yes相关蛋白(Yes-associated protein，YAP) 因与Src蛋白激酶家族中的Yes蛋白的SH3区域结合而命名为Yes-associated protein65(YAP65)[1]。最近研究发现YAP是Hippo通路的关键效应因子，而Hippo通路是调节细胞增殖和凋亡的关键信号通路。TEAD是位于Hippo通路中YAP下游的最主要的转录因子之一，YAP通过与TEAD的相关结构域结合而发挥重要作用[2]。尽管越来越多的研究表明YAP在肿瘤的发展中具有重要作用，但YAP在肾癌中的作用仍不甚清楚，相关研究尚未深入开展。本研究目的旨在通过慢病毒介导的干扰载体沉默YAP基因，探讨沉默YAP后对肾透明细胞癌增殖和凋亡的影响及其可能的机制。

    1.资料与方法

    1.1 一般资料

    ACHN肾癌细胞株购自ATCC；786-O、caki-2肾癌细胞株及HEK-293细胞株由本实验组保存；PRMI 1640、DMEM培养基购自Hyclone公司；胎牛血清FBS购自杭州四季青公司及Hyclone公司；引物由华大基因公司构建并检测；Total RNA提取试剂、逆转录试剂盒、TaqDNA 聚合酶及Marker购自大连宝生物工程有限公司(Takara)；YAP兔抗人多克隆抗体购自美国Santa Cruz生物技术公司，TEAD1抗体购自美国Proteintech Group生物技术有限公司.；CCK-8细胞计数试剂盒购自美国Sigma公司 ......