流动相pH值对离子型物质分离的影响
离子化,碱性,流动相pH值对分离的影响,合理认识流动相pH值在分离中的作用,pH值调节在色谱分离中的应用,讨论
刘珍 王彦 闫超(上海交通大学药学院 上海 200240)
在多物质的液相色谱分离过程中,常常包含有酸碱离子型化合物,除了通过筛选色谱柱、更改流动相种类和比例等方式外,调节流动相的pH值常常是改善该类物质分离度的有效手段。本文从理论上进行分析,并且辅以具体的实例,阐述了这一行为在色谱分离中的应用和注意事项。
1.流动相pH值对分离的影响
流动相的pH值对酸碱离子型的物质影响最为显著,其保留与pH值的关系有详细的理论分析[1]。简单来说,酸性物质在低pH条件下呈分子态,保留较强;在高pH条件下呈离子态,保留较弱。碱性物质在高pH条件下呈分子态,保留较强;在低pH条件下呈离子态,保留较弱。
对于中性物质,保留时间一般不受pH值影响,重现性相对比较好;对于离子型物质,如上所述,在一定的pH值范围内,保留时间受pH值影响很明显,特别是临近pKa附近,微小的pH值波动就可能使保留时间出现较大的变化,导致方法的重现性较差。
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图1 不同pH值下离子型物质的分子-离子态转化和保留时间的变化
离子型物质的离子化过程如下:
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上图从微观和宏观上很好的描述了这种现象[2] ......
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