胺碘酮对人胚肺成纤维细胞增殖及氧化应激的影响
肺纤维化,资料与方法,1一般资料,2方法,3统计学方法,结果,1胺碘酮对各组HELF细胞形态的影响,2不同浓度胺碘酮对HELF细胞的增殖作用,3不同浓度胺碘酮对HELF细胞的ROS水平影响,4不同浓度胺碘酮对细胞M
阮宏亘 陈敏菲 周小明 侯若南 王志翊(通讯作者)(1 长沙医学院临床学院 湖南 长沙 410000)
(2 温州医科大学附属第二医院全科医学科 浙江 温州 325000)
胺碘酮是Ⅲ类抗心律失常药,临床上主要用于治疗室性和室上性心律失常。然而,胺碘酮导致的肺毒性及肺纤维化是其最严重的不良反应,且病死率高[1]。肺纤维化的典型病理学过程为肺泡上皮损伤,炎性细胞聚集,成纤维细胞增殖、活化,细胞外基质过度沉积,最终导致肺组织结构异常[2]。研究表明,成纤维细胞灶的增加是肺纤维化进展和预后不良的重要因素[3],而成纤维细胞的增殖被认为可能与氧化--抗氧化平衡失调有关[4]。目前有关胺碘酮致成纤维细胞氧化应激损伤研究尚未见文献报道,本研究通过不同浓度胺碘酮作用于人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF),观察其对HELF 增殖与氧化应激水平的影响,为今后从氧化应激角度寻找胺碘酮诱导的肺纤维化治疗靶点奠定实验基础。
1.资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1 主要试剂 盐酸胺碘酮注射剂(杭州 Sanofi-Aventis),胎牛血清、DMEM 培养基(Gibco 公司),细胞计数CCK8 试剂盒(日本同仁),活性氧(ROS)检测试剂盒(碧云天生物技术研究所),超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)检测试剂盒(南京建成生物公司),HELF 细胞来源于中国科学院昆明细胞库。
1.1.2 主要仪器 酶标仪(美国Thermo scientific 公司)、HEPA CO2恒温培养箱(美国Thermo scientific 公司)、1300 SERIES A2 生物安全柜(美国Thermo scientific 公司)。
1.2 方法
1.2.1 HELF细胞培养与分组 HELF细胞从液氮取出复苏后,置于含10%FBS 和1%青链霉素混合液的DMEM 培养基 ......
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