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编号:472136
肥胖对雄性小鼠生殖系统的损伤及表观遗传机制研究
http://www.100md.com 2021年6月29日 医药前沿 2021年第10期
乙酰化,精子,密度,材料与方法,1实验动物及分组建模,2指标检测,3统计学分析,结果,讨论
     王翠艳,杜学孟,刘红英,董晓云(通讯作者)

    (潍坊医学院 山东 潍坊 261053)

    近年来研究表明,肥胖可影响精子的正常发育与成熟过程[1],对精子质量有着至关重要的影响[2],但具体机制尚不明确。表观遗传改变在精子发育过程中的作用受到了越来越多的关注,如精子残余组蛋白是否被正确修饰是精子正常发育和成熟的关键环节[3]。本实验旨在研究肥胖对雄性小鼠生殖系统的损伤及对残余组蛋白H3乙酰化修饰的影响,以期从表观遗传学角度为男性不育的临床治疗提供新策略。

    1.材料与方法

    1.1 实验动物及分组建模

    选取2019年10月—2020年6月健康SPF级C57BL/6雄鼠20只,周龄5周,初始体重19~20 g,随机分为肥胖组和对照组。肥胖组选用高脂饲料配方喂养,对照组选用标准饲料喂养,建模期间,两组小鼠饮水光照等条件相同。

    1.2 指标检测

    1.2.1 标本采集 定时监测小鼠体重,建模成功后,称量腹部脂肪,做血脂分析,取附睾做精子形态观察,以及精子密度、活力参数、动力参数检测分析,并提取组织蛋白,做Western Blot免疫印迹实验。

    1.2.2 血脂检测 用注射器抽取小鼠心脏血液约1 mL置于1.5 mL Ep管中,5 000 rpm,5 min离心取血清,使用全自动生化分析仪做血清甘油三酯和总胆固醇检测。

    1.2.3 精子指标分析 用伟力图像分析系统进行精子形态、密度、活力、畸形率等参数的检测 ......

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