ABCG2基因单核苷酸多态性与闽南地区人群原发性痛风相关性研究(2)
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2.5 电泳检测 对所有PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析：取7 ?l PCR产物，混合1.5 ?l 的6×loading buffer，2 %琼脂糖电泳，电泳缓冲液为1×TAE，电压100 v，电泳时间10 min；琼脂糖凝胶采用GoldView核酸染料染色(5 μl·100ml-1)，凝胶成像仪观察结果并拍照，记录并分析相关基因型。
2.6 相关生化指标检测 采用全自动生化分析仪对所选人群的与痛风发病相关的血尿酸、尿尿酸、血沉、C–反应蛋白、血甘油三酯、血胆固醇、尿素氮、肌酐等进行检测，同时还测量血糖、收缩压、舒张压、肾结石等指标，根据肾结石大小和分布将其量化，其中未见明显异常为1，单侧肾脏出现结石为2，双侧结石为3。
2.7 统计分析 将痛风患者和健康志愿者按年龄分为3组，对获得的实验数据进行整理，SNP的hardy–weinnerg平衡采用在线工具进行计算，采用SPSS17.0 数据分析软件对获得的数据进行分析和处理(P<0.05为显著性差异)，各等位基因的相对危险度(odd ratio，OR)值通过非条件Logistic回归法计算OR的比值比和95 %的可信区间[6]，并经年龄、甘油三酯等因素校正。根据以上结果分析泉州地区人群痛风相关的rs2231142位点基因性型的与闽南地区人群痛风发病的相关性。
3 结 果
3.1 引物设计与全血扩增 有关rs2231142位点的扩增引物如下表，为了增强三引物法扩增特异性，等位基因特异性内引物(rs142PRN1，rs142PRN2)倒数第3位引入了错配碱基。本研究采用华东医学技术研究所研制的全血扩增缓冲液(HpH buffer)[5] ......
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