断藤益母汤含药血清对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及TNF—α分泌的影响(2)
1 实验材料
1.1 滑膜组织来源 选取2011年在广州中医药大学第一附属医院行膝关节置换术的女性RA患者2例,均符合1987年美国风湿病学会修订的类风湿关节炎诊断标准,标本获取经由患者及主管医师知情同意。
1.2 药品与试剂 断藤益母汤(DYD)由川续断15 g、桂林产昆明山海棠45 g、益母草15 g组成。所有中药饮片均购自广州致信药业有限公司,水煎2 次合并药液,3次过滤浓缩,给药时以注射用水定容至0.6 g·mL-1;来氟米特(LEF),国药准字H31020644,批号201103,规格20 mg,购自江苏欣凯-长征有限公司。I型胶原酶、RPM I1640培养液、胰蛋白酶、胎牛血清,购自美国Invitrogen公司;噻唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO), 购自美国Sigma公司。
1.3 主要仪器 高速低温离心机(LAB-Y01型,TCHLAB,广州);酶联免疫检测仪(美国BIO—RAD680公司);倒置显微镜(OLYMPUS-Ⅱ,日本);CO2培养箱(HF90型 ......
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