乌龙丹对大鼠胶原诱导性关节炎的影响(2)
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1.2 主要试剂及药品 牛Ⅱ型胶原(typeⅡcellegan of bovine,BCⅡ)与弗式完全佐剂购于sigma公司。白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)Elisa试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司。基质金属蛋白酶-3(MatrixMetalloproteinase3,MMP-3)、IL-17F Elisa试剂盒购于美国R&D公司。乌龙丹由乌骨藤、穿山龙、秦艽、杜仲、白芍、川断、木瓜、威灵仙组成(由黑龙江中医药大学药学院国家中药材规范化生产及质量标准实验室提取制备,1 g浸膏相当于生药5.3 g)。
2 方 法
2.1 BCⅡ乳剂制备 在无菌条件下用0.1 mL·L-1冰醋酸充分溶解BCⅡ,浓度为4 mg·mL-1,置4 ℃冰箱过夜后,与弗氏完全佐剂等体积混合,振荡乳化,制成BCⅡ乳剂(即每0.5 mL含1 mg BCⅡ)。
2.2 模型建立 取Wistar雄性大鼠,随机选出10只为正常组。其余大鼠于颈、背部5个部位皮内注射BCⅡ乳剂总量0.5 mL(含1 mg BCⅡ)。第21天0.3 mL加强注射,方法同上。
2.3 分组及处理 将造模成功的大鼠随机分为模型组,乌龙丹高、中、低剂量组4个组,每组10只。乌龙丹高、中、低剂量组分别给予14 g·kg-1、7 g·kg-1、3.5 g·kg-1生药,每次1 mL,每日灌胃1次;正常组与模型组予等容量蒸馏水;各组均于造模第10天开始给药,共给药28 d ......
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