寒痹康汤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞NF—κB表达的影响(2)
 |
| 第1页 |
参见附件。
2 mL·(100g)-1，每日分2次进行灌胃。
2.3 检测项目
2.3.1 关节肿胀指数 参照文献资料[2]采用0～4级关节评分法进行评分。0分：无关节炎；1分：小趾关节轻度肿胀；2分：小趾关节和足跖肿胀；3分：踝关节以下的足爪肿胀；4分：包括踝关节在内全部关节肿胀。关节指数积分越高，关节症状越严重。评分4分以上为造模成功。
2.3.2 标本采集 正常对照组、模型组及各实验组大鼠灌胃治疗36 d后，腹腔内注射2%戊巴比妥钠注射液进行麻醉，逐层分离膝关节各层组织，采集滑膜组织，用甲醛固定，石蜡包埋切片，切片厚度5 μm。
2.3.3 NF-κB的检测 石蜡切片常规脱蜡至水。PBS冲洗3次，每次3 min。滴加3% H2O2去离子水，37 ℃温箱孵育10 min。蒸馏水冲洗，PBS浸泡5 min。滴加试剂A，37 ℃温箱孵育15 min，倾去，勿洗。滴加1∶200的NF-κB兔抗体，4℃孵育过夜。PBS冲洗3次，每次3 min，滴加试剂B，37 ℃温箱孵育15 min。PBS冲洗3次，每次3 min，滴加试剂C，37℃温箱孵育15 min。PBS冲洗3次，每次3 min，DAB显色剂显色。自来水充分冲洗，脱水、透明、中性树胶封片。用图像分析仪进行图像分析，测定其平均灰度值。
2.4 统计学方法 采用SPSS15.0软件进行统计分析，计量资料用表示，组间差异采用方差分析及t检验，以P < 0.05 为差异有统计学意义。
3 结 果
实验结果显示，模型组大鼠关节滑膜的NF-KBp65的阳性染色强度明显高于正常对照组，差异有统计学意义(P < 0.05)。经过甲氨蝶呤、寒痹康汤治疗36 d后，各治疗组的NF-κBp65的表达均下调，接近于正常水平，与正常对照组比较，差异无统计学意义(P > 0.05)。寒痹康汤组与甲氨蝶呤组比较 ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件。