透骨消痛胶囊对兔膝骨关节炎模型血清与关节液炎症因子的影响(2)
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参见附件。
稀释标准品、10 μL样品和40 μL样品稀释液分别至每孔,封板膜封板,37 ℃恒温箱避光温育30 min,全自动酶标洗板机洗板5次;每孔加入酶标试剂50 μL,空白孔除外;37 ℃恒温箱避光温育30 min,全自动酶标洗板机洗板5次;每孔先加入显色剂A 50 μL,再加入显色剂B 50 μL,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 min;每孔加入终止液50 μL,并于15 min内,以空白孔调零,在450 nm波长依序测定各空的吸光度(OD值)。以标准品浓度作为横坐标,OD值作纵坐标,计算出标准曲线的4-Parameter回归方程,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
2.6 统计学方法 采用SPSS 19.0软件进行统计分析。计量资料以表示,组间差异采用单因素方差分析。以P < 0.05表示差异具有统计学意义。
3 结 果
3.1 模型及关节液外观变化
3.1.1 行为变化 造模后,兔均出现跛行,患肢不愿活动,造模侧膝关节较健侧肿胀。触摸右膝关节时出现挣扎、弹腿,在空地上驱行时出现右后腿跛行。空白对照组未出现疼痛行为改变。
3.1.2 关节液的变化 正常兔膝关节关节液呈无色﹑透明、黏稠状;OA兔膝关节关节液呈淡黄﹑半透明,浓稠,部分标本可见少许白色絮状漂浮物。
3.1.3 模型对照组IL-1β、TNF-α、MMP-3水平的变化 各指标模型对照组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P < 0.05),揭示造模成功,且模型对照组炎症明显 ......
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