玻璃酸钠联合免疫三氧对大白兔创伤性滑膜炎的影响(2)
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参见附件。
滴加二抗，37 ℃下20 min，PBS洗3次，每次2 min。滴加试剂SABC，37 ℃下20 min，PBS洗4次，每次5 min。使用DAB显色试剂盒，取1 mL蒸馏水，加试剂盒中A、B、C试剂各1滴，混匀后加至切片，室温显色，镜下控制反应时间2 min左右，蒸馏水洗涤。梯度酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封片，显微镜下观察。阴性对照以PBS取代一抗。
1.5 一氧化氮(NO)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的检测 按前述方法，取100 mg髌骨脂肪垫进行取待测组织100 mg 加0.9 mL 双蒸水，用玻璃匀浆器充分匀浆，低温离心机5 000 r·min-1离心10 min，取上清液，按试剂盒说明测定NOS 活性及NO含量。
1.6 平均阳性表达面积均值(MSA)和平均积分光密度(MIOD)的测量 参照前述的方法[4]， 在10×40倍显微镜下观察NF-κB、TNF-α、MMP-3/9阳性表达情况。用CRI micro color显微图像拍摄系统，将镜下视野显示在 17 英寸 RGB屏上进行拍摄。每个视野在屏上的显示范围均为760×560像素。每张切片任选5个视野，用Image pro plus 6.0专业图象分析软件分析MIOD、MSA的差异。首先进行灰度-光密度转换、光密度较正，然后较正微标尺，手工选择感兴趣区，按预先编制好的宏进行自动测量。光密度较正范围为0～234(0为代测图片上颜色最浅的部位的光密度值，235为图片颜色最深的部位的光密度值)。单个像素单位的实际面积均为0 ......
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