独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞线粒体凋亡通路的影响(3)

http://www.100md.com 2014年10月1日 吴广文 王武炼 潘彩彬 郑春松 叶锦霞 刘献祥

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    参见附件。

     线粒体膜电位的下降是线粒体凋亡途径激活的标志性事件[6-7]。JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm

    的理想荧光探针。在正常细胞中，线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，488 nm激发时的最大发射波长为590 nm，可以产生红色荧光，在流式图(UR象限)上表现为FL1和FL2双阳性[8]；不健康的线粒体由于线粒体膜电位下降或丧失，JC-1不能聚集在线粒体基质中，此时JC-1为单体，488 nm激发时最大发射时的波长为527 nm，可产生绿色荧光，在流式图(LR象限)中所有细胞FL1均为阳性[9]。因此，通过检测JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地观察细胞膜电位的改变情况，可将JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。本研究结果发现，随着干预时间的延长，空白血清组和含药血清组中，LR象限阳性细胞百分率均逐渐降低；和空白血清组相比，含药血清组降低更明显。结果显示，含药血清干预后，各组的线粒体膜电位下降减少，提示独活寄生汤可以通过线粒体凋亡通路抑制退变软骨细胞的凋亡。

    Bcl-2蛋白家族是调节线粒体凋亡途径的关键因子，包括以Bcl-2为代表的抗凋亡成员和以Bax为代表的促凋亡成员 ......

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